慢性肾脏病患者基因组DNA整体甲基化与血浆非对称性二甲基精氨酸关系研究

摘要

背景: 慢性肾脏疾病（CKD）在世界范围内有着较高的发病率，已经成为一个威胁全世界公众健康的主要疾病之一。目前国内外对CKD的发病机制还不甚清楚，给疾病的防治带来了巨大的困难。现有研究表明许多基因的表达异常在CKD的发病机制中起着重要作用，而基因启动子区的甲基化水平在调节基因转录过程中发挥着关键作用。因此，研究基因的甲基化水平对阐明CKD的发病机制及其疾病的进展有着重要意义，同时DNA甲基化的研究也成为目前生命科学研究领域的热点。虽然国外已有少数关于CKD患者基因组DNA甲基化的研究，但研究结果不一致，且国内缺乏相关方面的报道。非对称性二甲基精氨酸（ADMA）是目前公认的心血管危险因子，其水平在CKD患者中明显升高，是终末期肾脏病（ESRD）患者心血管疾病并发症的独立危险因素。但目前对于CKD患者血浆ADMA升高的原因尚不十分清楚，许多基因对ADMA的代谢起着重要的调控作用，是否基因组DNA甲基化水平与其相关目前尚未见报道。 目的: 检测慢性肾脏病（CKD）5期非透析患者血白细胞基因组DNA整体甲基化水平及血浆ADMA浓度，初步了解在患者中两者水平的改变及其相互关系。 方法: 根据改良的MDRD公式估算肾小球滤过率及美国K/DOQI专家提出的诊断标准，选取我院肾内科确诊为CKD5期的非透析住院病人40名和我院健康体检者32名。分别收集一般资料及临床生化指标，采用苯酚/氯仿法提取血白细胞基因组DNA，应用高效液相色谱仪检测基因组DNA整体甲基化水平和色谱－质谱联用仪检测血浆ADMA浓度。 结果: 1、CKD5期非透析患者基因组DNA整体甲基化水平（4.498％±0.109％ vs4.428％±0.096％，P<0.01）及血浆ADMA浓度（0.563μ mol/L±0.193μ mol/L vs0.454μ mol/L±0.137μ mol/L，P<0.01）均明显高于正常对照组。 2、CKD5期非透析患者基因组DNA整体甲基化水平与血白蛋白浓度呈明显负相关（r=-0.438，P=0.002），与血尿素氮（r=0.353，P=0.012）呈明显正相关，而在正常对照组中无此相关趋势。 3、CKD5期非透析患者血浆ADMA浓度与基因组DNA整体甲基化水平（r=0.324，P=0.034）及血肌酐浓度（r=0.315，P=0.038）呈正相关。 结论: 1、CKD5期非透析患者基因组DNA整体甲基化水平及血浆ADMA浓度均明显升高。 2、DNA甲基化水平的升高可能在CKD患者的高ADMA血症中起着一定的作用。 3、DNA甲基化水平异常可能参与着慢性肾脏病患者心血管疾病的发生发展，也许能作为尿毒症患者心血管疾病危险性的一个预测指标。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词

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第一章前言

第二章材料与方法

2.1主要实验材料和研究对象

2.2实验方法

2.3统计学处理

第三章实验结果

3.1两组研究对象的基本资料对比

3.2病例组与正常对照组基因组DNA甲基化水平及血浆ADMA浓度比较

3.3基因组DNA整体甲基化水平与临床生化指标相关分析

3.4血浆ADMA浓度与临床生化指标相关分析

第四章讨论

4.1 DNA甲基化与慢性肾脏疾病

4.2 DNA甲基化与血浆ADMA

4.3局限性与展望

第五章结论

参考文献

综述:DNA甲基化与肾脏疾病

致谢