骨桥蛋白在先天性心脏病心肌中的表达及其相关研究

摘要

目的:通过检测先天性心脏病(CHD)患儿心肌中骨桥蛋白(OPN)的表达水平，分析OPN与CHD类型（紫绀型及非紫绀型）、心肌纤维化程度、缺氧程度、年龄等的关系，探讨OPN在CHD心肌纤维化中的作用。
　　 方法:选择同期行手术治疗的先天性心脏病患者45例，其中非紫绀型先天性心脏病25例（非紫绀组），男15例、女10例，年龄0.5～9.2岁，平均5.03±1.08岁；紫绀型先天性心脏病20例（紫绀组），男12例、女8例，年龄0.5～8.5岁，平均4.53±1.82岁。术中取右心耳心肌组织约100mg，通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组患儿心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、OPN mRNA的表达水平。应用SPSS13.0统计软件分析比较两组患儿心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白、OPN的表达水平及各目的基因与缺氧、年龄、缺损大小的相关性，以及OPN mRNA与Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的关系。
　　 结果:(1)紫绀型先天性心脏病组较非紫绀型先天性心脏病组Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达水平明显升高(Ⅰ型胶原蛋白p＜0.01、Ⅲ型胶原蛋白p＜0.01)；(2)紫绀型先天性心脏病组较非紫绀型先天性心脏病组OPN mRNA的表达水平明显升高(p＜0.05)；(3)Ⅰ型与Ⅲ型胶原蛋白的表达与患儿年龄成正相关(Ⅰ型胶原蛋白与患儿年龄r＝0.331,p＜0.05；Ⅲ型胶原蛋白与患儿年龄r＝0.372,p＜0.05)，而与血氧饱和度成负相关(Ⅰ型胶原蛋白与血氧饱和度r＝-0.561,p＜0.001；Ⅲ型胶原蛋白与血氧饱和度r＝-0.537,p＜0.001)；(4)OPN mRNA的表达水平与心肌胶原蛋白的表达及缺损大小成正相关(OPN与Ⅰ型胶原蛋白r＝0.625，p＜0.001；OPN与Ⅲ型胶原蛋白r＝0.287，p＜0.05；OPN与缺损大小r＝0.524，p＜0.001)，与血氧饱和度成负相关(OPN与血氧饱和度r＝-0.703，p＜0.001)。
　　 结论:(1)紫绀型先天性心脏病较非紫绀型先天性心脏病患儿心肌Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达水平明显增高；(2)OPN在紫绀型先天性心脏病患儿心肌中明显增高，并与心肌纤维化指标存在正相关，OPN可能参与了先天性心脏病特别是紫绀型先天性心脏病心肌纤维化的过程；(3)先天性心脏病心肌纤维化可能同患儿年龄、缺氧程度有关；(4)OPN的表达与血氧饱和度存在明显负相关，与缺损大小存在正相关，提示缺氧及容量负荷增加可引起OPN表达增强。

目录

文摘

英文文摘

英文缩写注解

第一章 前言

第二章 材料和方法

1 实验材料

1.1 研究对象及分组

1.2 入选标准

1.3 仪器设备

1.4 主要试剂

1.5 常用试剂配制

2 实验方法与步骤

2.1 标本的采集

2.2 RT-PCR方法检测各组心肌标本Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、OPNmRNA的表达

3 统计学方法

第三章 结果

1 各组标本总RNA分析

1.1 总RNA纯度评价

1.2 RNA质量评价

2 两组心肌纤维化程度比较

3 OPN在两组心肌的基因转录水平比较

4 各目的基因与年龄、血氧饱和度、缺损大小的相关分析

5 OPN与心肌纤维化的相关性分析

第四章 讨论

1 先天性心脏病心肌纤维化胶原改变

2 OPN与心肌纤维化

3 缺氧与心肌纤维化

4 缺氧与OPN表达

5 本实验的局限性及展望

第五章 结论

参考文献

综述骨桥蛋白与心肌重塑

致谢