染色体7q的10个基因与儿童孤独症及RELN与精神分裂症的关联研究

摘要

儿童孤独症(Autism，MIM209850)是一种以社会交往和语言沟通障碍、刻板行为及兴趣范围狭窄为主要特征的儿童广泛性发育障碍；也是最常见的儿童精神疾病之一，世界范围内的发病率约为1～6‰。近年来相关研究已揭示了若干孤独症的易感位点和基因，但其主要易感基因尚不明确。基于家系的连锁分析揭示了多个与孤独症相关的染色体区域，其中染色体7q是得到最多重复验证、并被荟萃分析证实的孤独症易感位点，称为AUST1。该区域内有一些基因被作为重要的孤独症候选基因开展相关性研究，如RELN、MET、FOXP2、CNTNAP2、EN2基因等；目前对于这些基因的研究结论并不一致，有待进一步阐明位于该区域内的重要孤独症易感基因。
　　 本研究以中国汉族儿童孤独症患者为研究对象(共455名患者，所有患者均根据DSM-Ⅳ标准作出诊断并签署知情同意书，同时选用1097名中国汉族正常人作为对照)，用Illumina Human CNV-370基因芯片进行基因分型，对孤独症候选基因开展病例.对照关联研究。在本研究中，分析了位于染色体7q、通过连锁分析获得最高重复性的3个区域：7q22、7q31和7q35-qter；在以上区域中挑选了10个基因(NPTX2、LRRN3、GPR85、FOXP2、MET、ST7、WNT2、GRM8、EN2和CNPY1基因)作为孤独症候选基因进行分析。
　　 通过对中国汉族儿童孤独症患者的病例-对照研究发现4个基因存在与孤独症显著相关的位点，它们分别是MET基因(rs2237712，X2=5.845，p=0.0156；rs2237713，X2=6.1，p=0.0135)，ST7基因(rs7788320，X2=5.037，p=0.0248；rs7785492，X2=4.341，p=0.0372)，EN2基因(rs1861958，X2=4.341，P=0.0372)和 GRM8基因(rs2108849，X2=4.92，p=0.0266；rs1419472，X2=4.12，p=0.0424；rs11563410，X2=6.573，p=0.0104；rs1156653，X2=4.181，p=0.0409；rs2283089，X2=4.377，p=0.0364)。此外，本课题组的前期研究还证实了位于染色体7q35—36的CNTNAP2基因也与中国汉族儿童孤独症显著相关。综上所述，MET、ST7、GRM8、EN2和CNTNAP2基因可能是位于染色体7q的重要孤独症易感基因。
　　 精神分裂症(Schizophrenia，MIM181500)是一种最常见的精神疾病，以基本个性的改变，思维、情感、行为的分裂，精神活动与环境不协调为主要特征。全世界平均患病率约为1％。研究表明：精神分裂症属于多基因遗传病，1p、1q、4p、6p、7q、8p、13q、22q等若干染色体区域可能存在精神分裂症易感位点(基因)。
　　 人类RELN(Reelin)基因位于染色体7q22，编码一个由3461个氨基酸组成的分泌型糖蛋白，在胚胎发育时期参与神经元迁移和大脑皮层、海马、小脑等高度层状结构形成的重要发育过程中，在成年人中枢神经系统调控突触可塑性。精神分裂症、双相情感障碍、孤独症和无脑回畸形等患者死后的尸检均发现脑部RELN基因表达量显著降低；有研究者提出该基因与多种精神疾病(如精神分裂症、抑郁症、双相情感障碍以及孤独症)的发病机制均相关。分子遗传学研究提供了RELN基因可能是精神分裂症易感基因的证据，但在中国人群中尚无相关报道。
　　 本研究以中国汉族精神分裂症家系为研究对象(包括44个家系，共计244名家系成员，其中104人被确诊为精神分裂症患者；所有诊断均由相关临床医师根据DSM-Ⅳ标准作出)。通过TaqMan-PCR法对位于RELN基因内部的2个SNPs位点(rs2229864和rs736707)进行基因分型，采用家系内传递不平衡检验开展RELN基因多态性与中国汉族人群精神分裂症的关联研究。结果显示：在精神分裂症家系中，SNP-rs2229864的C等位基因频率分布存在显著差异(X2=7.049，p=0.0079)，rs2229864-rs736707组成的单倍型“TT”传递与未传递的比例存在显著差异(X2=7.438，p=0.0064)。本研究表明：RELN基因可能与中国汉族人群精神分裂症发生相关，该基因可能是一个精神分裂症的易感基因。