药对干姜-高良姜挥发油化学成分及中药丹参指纹图谱研究

摘要

中药的化学成分种类繁多,含量差异很大,构成了非常复杂的分析体系,如何准确地分析中药成分,评价药品质量,阐明中药药理作用一直是比较困难的问题。近年来随着联用仪器:如高效液相色谱-二级管阵列(HPLC-DAD)、高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)、气相色谱-质谱(GC-MS)等现代化检测仪器的出现,加上化学计量学理论方法的支持,如交互移动窗口因子分析法(Alternative Moving WindowFactor Analysis,AMWFA)、直观推导式演进特征投影法(Heuristicevolving latent projections,HELP)等方法都广泛应用于分析数据的解析,很好的将色谱分离能力与光谱定性能力有机结合,从而使准确定性定量中药成分,科学评价中药质量,合理解释中药药理作用成为可能。
　　 本文以中药药对干姜-高良姜及广泛应用的中药丹参为研究对象,利用联用色谱仪器结合化学计量学分析的方法,测定了其含有挥发油的种类、含量及讨论了在配伍前后的变化;同时完成了丹参指纹图谱的构建。本文内容大体可以分为以下两部分:
　　 一.利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用仪器对单味药干姜、高良姜及其药对的挥发油成分进行检测,进一步利用交互移动窗口因子分析法(Alternative Moving Window Factor Analysis,AMWFA)对它们的共有成分进行分析,利用直观推导式演进特征投影法(Heuristicevolving latent projections,HELP)对色谱图中的重叠峰、包埋峰进行解析。
　　 结果表明:药对干姜-高良姜的挥发油成分是两种单味药成分的加合。其中干姜的挥发油成分鉴定了33种,占挥发油总量的80.03％;高良姜的挥发油成分鉴定了46种,占总量的85.96％;药对的挥发油成分鉴定了48种,占总量的81.09％。同时药对中出现了16种新的化学成分,它们的相对含量为2.55％。
　　 二.利用高效液相色谱-二级管阵列(HPLC-DAD)联用仪器分析了30批次不同产地、不同炮制方法的丹参含有的化学成分,构建了丹参的指纹图谱,并得到了不同批次丹参指纹图谱的共有模式。
　　 结果说明:丹参在炮制的过程中,虽然出现了部分化学成分缺失或转化成新物质,但对四种主要成分的定量分析及指纹图谱的整体相似度来看,丹参药材在加工炮制过程中并未造成大量成分的变化和重要活性成分的缺失,加工得到的3类炮制品化学成分基本一致。由此说明采用该炮制工艺处理丹参是合理可行的,利用HPLC-DAD构建中药指纹图谱是科学评价中药质量的有效方法。
　　 本文为中药配伍规律的研究和中药质量控制方法的发展提供了一定的实验基础。

目录

文摘

英文文摘

第一章 绪论

1.1 药对

1.1.1 药对发展概述

1.1.2 药对配伍规律

1.1.3 研究药对配伍规律的重要性

1.2 中药指纹图谱

1.2.1 中药的质量控制现状

1.2.2 中药质量控制的新方法—“指纹图谱”

1.3 现代分析技术在中药研究中的应用

1.4 化学计量学在中药研究中的应用

1.4.1 直观推导式演进特征投影法(HELP)

1.4.2 交互移动窗口因子分析法(AMWFA)

1.5 关于保留指数

1.6 本文研究内容

第二章 药对干姜-高良姜挥发油成分的分析

2.1 化学计量学方法理论

2.2 实验部分

2.2.1 试剂与仪器

2.2.2 挥发油提取

2.2.3 GC-MS实验条件

2.2.4 数据处理

2.3 结果与讨论

2.3.1 AMWFA法对药对干姜-高良姜与单味药挥发油共有成分的分析

2.3.2 HELP法对非共有的重叠峰解析

2.3.3 定性定量结果

2.4 小结

第三章 丹参指纹图谱研究

3.1 丹参化学成分概述

3.2 丹参指纹图谱研究的意义

3.3 指纹图谱实验条件的确定

3.3.1 样品及试剂来源

3.3.2 实验仪器

3.3.3 丹参有效成分提取方法优化

3.3.4 色谱柱的选择

3.3.5 流动相的选择

3.3.6 洗脱程序的梯度优化

3.3.7 流速的选择

3.3.8 检测波长的选择

3.3.9 指纹图谱实验条件总结

3.4 供试品溶液的制备

3.5 对照品溶液的制备

3.6 定性分析

3.7 定量分析

3.7.1 标准曲线的绘制

3.7.2 定量分析结果

3.8 实验方法学验证

3.8.1 仪器精密度实验

3.8.2 重复性实验

3.8.3 稳定性实验

3.8.4 加样回收实验

3.9 丹参指纹图谱共有模式确立

3.9.1 丹参原药材指纹图谱共有模式

3.9.2 丹参破壁粉体指纹图谱共有模式

3.9.3 丹参破壁粉粒指纹图谱共有模式

3.9.4 丹参原药材、破壁粉体及破壁粉粒指纹图谱比较研究

3.10 小结

第四章 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间主要的研究成果