新型HDAC抑制剂CC1007体外抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

摘要

目的：
　　 研究新型组蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase，HDAC)抑制剂（简称HDACI）CC1007对人宫颈癌细胞株的体外增殖、迁移、侵袭能力及克隆形成的影响。
　　 方法：
　　 1、细胞活力实验(TheCellTiter-Glo①LuminescentCellViabilityAssay)检测不同浓度梯度的CC1007干预对数生长期的HeLa、Caski、C33a细胞48h后的细胞生长抑制率，同时设置对照组和调零组，计算50％致死浓度(IC50)，并绘制浓度-抑制率曲线。实验重复3次;
　　 2、细胞平板克隆实验检测不同浓度梯度的CC1007干预对数生长期的HeLa、Caski、C33a细胞14天后的细胞克隆形成率，同时设置对照组和调零组，予以0.1％的结晶紫染色后拍照。实验重复3次;
　　 3、Transwell细胞体外迁移实验检测不同浓度梯度的CC1007作用对数生长期的HeLa、Caski、C33a细胞12h迁移到Tanswell小室下室面的数目，同时设立对照组，予以0.1％的结晶紫染色后拍照。实验重复3次;
　　 4、Transwell细胞体外侵袭实验检测不同浓度梯度的CC1007作用对数生长期的HeLa、Caski、C33a细胞24h侵袭到tanswell小室下室面的细胞数目，同时设立对照组，并0.1％的结晶紫染色后拍照。实验重复3次。
　　 结果：
　　 1、细胞活力实验(TheCellTiter-Glo(①)LuminescentCellViabilityAssay)检测CC1007以10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L浓度作用于HeLa48h后，抑制率依次分别为:39.33±0.93％、70.6±0.678％、86.93±0.55％、91.08±0.15％，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于Caski48h后，抑制率依次分别为:26.94±2.95％、59.61±0.33％、91.61±2.4％、98.79±0.14％，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于C33a48h后，抑制率依次分别为67.34±1.54％、83.12±0.19％、90.72±0.19％、92.11±0.64％，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义。CC1007对宫颈癌细胞增殖的抑制率呈浓度依赖性。
　　 CC1007作用于Hela48h的50％致死浓度(IC50)为12.53μmol/L;CC1007作用于Caski48h的50％致死浓度(IC50)为15.08μmol/L;CC1007作用于C33a48h的50％致死浓度(IC50)为5.36μmol/L。
　　 细胞平板克隆实验检测CC1007以2μmol/L、4μmol/L浓度作用于Hela14天后的相对克隆形成率依次分别为43.54±2.30％、3.61±1.19％，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于Caski14天后的相对克隆形成率依次分别为44.31±2.60％、3.09±0.61％，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于C33a14天后相对克隆形成率分别为33.46±2.51％、2.92±0.84％，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义。CC1007对宫颈癌细胞的克隆形成的抑制呈浓度依赖性。
　　 3、Transwell细胞体外迁移实验CC1007以20μmol/L、40μmol/L浓度作用于Hela12h后迁移到Transwell小室下室面的细胞数分别为255.67±12.5个、131±6.93个，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于Caski12h后迁移到Transwell小室下室面的细胞数分别为145±9.64个、77.67±0.58个，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于C33a12h后迁移到Transwell小室下室面的细胞数分别为192.67±23.35个、128.33±35.57个，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义。CC1007对宫颈癌细胞体外迁移的抑制呈浓度依赖性。
　　 4、Transwell细胞体外侵袭实验CC1007以20μmol/L、40μmol/L浓度作用于Hela24h后侵袭到平铺基质胶的Transwell小室下室面的细胞数分别为240.67±23.71个、130.33±22.9个，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于Caski24h后侵袭到平铺基质胶的Transwell小室下室面的细胞数分别为160±4.36个、76.33±5.03个，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义;作用于C33a24h后侵袭到平铺基质胶的transwell小室下室面的细胞数分别为32.33±5.13个、13.67±1.15个，与对照组比较及药物浓度组间比较，均是P值＜0.05，有统计学意义。CC1007对宫颈癌细胞体外侵袭的抑制呈浓度依赖性。
　　 结论：
　　 1、CC1007可有效抑制宫颈癌细胞增殖及克隆形成，并呈浓度依赖性。
　　 2、CC1007可有效抑制宫颈癌细胞的体外迁移和侵袭能力，并呈浓度依赖性。

目录

声明

摘要

英文缩略词

前言

第二章 材料与方法

1 材料与仪器

2 实验方法

3 统计学处理

第三章 结果

1、细胞活力实验(The CellTiter-Glo? Luminescent Cell Viability Assay)检测细胞的生长抑制率

2、细胞平板克隆实验检测CC1007对细胞克隆形成的影响

3、Transwell细胞体外迁移实验CC1007对宫颈癌细胞体外侵袭能力的影响

4、Transwell细胞体外侵袭实验检测CC1007对宫颈癌细胞体外侵袭能力的影响

第四章 讨论

第五章 结论

参考文献

综述

致谢