HSP90在糖尿病大鼠血清和胸主动脉中的表达及普罗布考的干预作用

摘要

目的:观察HSP90在糖尿病大鼠血清、胸主动脉中的表达，分析其与氧化应激及糖尿病大血管病变的关系。观察普罗布考干预治疗对糖尿病大鼠血清及胸主动脉HSP90的影响。
　　方法:50只雄性8周龄SD大鼠，随机分为普通饲料喂养的正常对照组N组(n=10)和高糖高脂饲料喂养组G组(n=40).4周后，将G组腹腔注射STZ溶液（30mg/kg）以建立糖尿病模型，N组以柠檬酸缓冲液腹腔注射。以随机血糖≥16.7mmol/L并维持2周者定为造模成功。随后将30只成模大鼠随机分为糖尿病对照组(DM组)、糖尿病普罗布考治疗组(PB组)，再继续喂养高糖高脂饲料。PB组以普罗布考500mg/kg.d灌胃，N组、DM组以等体积的0.5％CMC溶液灌胃。灌胃8周后处死大鼠，采血分离血清测甘油三脂(TG)，总胆固醇(TC)，高密度脂蛋白胆固醇(HDL)，低密度脂蛋白胆固醇(LDL)。酶联免疫法测血清MDA、SOD、HSP90含量;取胸主动脉光镜下观察胸主动脉损伤程度，免疫组织化学方法检测血管组织HSP90、eNOS的表达。
　　结果:
　　(1)PB组的TC和HDL较N组和DM组均有明显降低(P＜0.01)，而LDL和TG在PB组较其他两组相比虽有降低趋势，但无统计学意义（P＞0.05）。DM组的TC、TG、LDL较N组均有升高(P＜0.05)，HDL虽有降低趋势，但无统计学差异（P＞0.05）。
　　(2)血清中DM组大鼠SOD水平明显低于N组大鼠（P＜0.001），MDA（P＜0.001）和HSP90（P＜0.05)水平均高于N组。PB组与DM组相比，SOD水平升高（P＜0.01），HSP90（P＜0.001)和MDA（P＜0.001)水平降低。HSP90与SOD呈负相关（r=-0.817，P＜0.05），与MDA呈正相关(r=0.658，P＜0.05)。
　　(3) DM组大鼠胸主动脉内皮细胞广泛脱落，平滑肌排列紊乱。PB组大鼠胸主动脉可见内皮细胞灶状脱落，平滑肌排列稍紊乱。N组大鼠内皮细胞光滑平整，平滑肌排列整齐。
　　(4) DM组大鼠较N组大鼠相比，胸主动脉表达HSP90明显升高（P＜0.05)。PB组与DM组比较，胸主动脉HSP90表达无明显差异(P＞0.05)。三组间胸主动脉表达eNOS无明显差异(P＞0.05)。
　　结论:
　　(1) HSP90在糖尿病大鼠血清及胸主动脉中的表达异常增高，并与血清氧化应激水平呈正相关。
　　(2)普罗布考降低糖尿病大鼠血清HSP90的表达，可以通过抗氧化应激改善糖尿病大血管病变。

目录

声明

摘要

英文缩写词表

第一章 前言

第二章 材料和方法

2．1 材料

2．1．1 动物

2．1．2 仪器设备

2．1．3 主要试剂

2．2 研究方法

2．2．1 技术路线

2．2．2 动物模型

2．2．3 干预处理

2．2．4 取血清及组织标本

2．2．5 酶联免疫法测定血清SOD、MDA

2．2．6 酶联免疫法测定血清HSP90

2．2．7 HE染色法观察胸主动脉损伤

2．2．8 免疫组织化学SP法检测HSP90在胸主动脉壁的表达

2．2．9 附试剂配制方法

2．3 统计学分析

第三章 结果

3．1 糖尿病大鼠模型的建立

3．1．1 SD大鼠的饲养和造模

3．1．2 注射STZ前两组大鼠血糖及体重情况

3．1．3 注射STZ 2周后两组大鼠血糖及体重情况

3．1．4 干预8周后三组血糖及体重情况

3．2 干预8周后三组的血脂情况

3．3 干预8周后血清HSP90及氧化应激指标的变化

3．4 血清HSP90和SOD、MDA的相关性分析

3．5 胸主动脉HE染色

3．6 胸主动脉HSP90免疫组化

3．7 胸主动脉eNOS免疫组化

第四章 讨论

4．1 糖尿病大鼠血清中HSP90的表达及其与氧化应激的关系

4．2 糖尿病大鼠胸主动脉HSP90和eNOS的改变及其意义

4．3 普罗布考干预对血清及胸主动脉HSP90的影响

第五章 结论

参考文献

综述 HSP90和eNOS与血管内皮功能紊乱的关系

致谢