320排CT全肝灌注成像评价肝癌血管生成及其与相关细胞因子表达关系的初步研究

摘要

目的:研究原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)的320排容积CT全肝灌注成像的表现及其与肝癌癌组织微血管密度和相关细胞因子Ang-2、Snail-2、Twist-1、E-cadherin、PAK4表达水平的关系，研究原发性肝细胞癌320排容积CT全肝灌注成像的表现与肝癌组织病理分级的关系，探讨320排容积CT全肝灌注成像评价原发性肝细胞癌血管生成及分化程度的价值。
　　方法:采用前瞻性研究方法选取符合纳入标准的原发性肝细胞癌患者30例归入原发性肝细胞癌组，同时选取10例肝脏正常者归入正常对照组。对所有患者行320排CT全肝灌注成像扫描，并对图像进行后处理，选定感兴趣区，生成时间-密度曲线及肝脏的灌注彩图，得到其灌注参数:肝动脉灌注量(hepatic arterial perfusion，HAP)、门静脉灌注量(hepatic portal perfusion，HPP)、肝动脉灌注指数(hepaticperfusion index，HPI)。采用免疫组织化学染色的方法检测HCC癌组织中CD105、Ang-2、Snail-2、Twist-1、E-cadherin、PAK4的表达，以Edmondson-Steiner分级法对HCC进行病理分级。对比分析HCC组及正常对照组的CT灌注参数及相关细胞因子表达水平差异;以Pearson直线相关或Spearman等级相关的统计学方法对HCC组癌组织CT灌注参数、以CD105标记的肿瘤微血管密度(microvesseldensity，MVD)、上述血管生成相关细胞因子表达及HCC病理分级之间的相关性进行分析。
　　结果:
　　1.正常对照组肝组织的HAP、HPP、HPI分别为35.79ml/100ml/min、130.61ml/100ml/min、22.63％。HCC组癌组织的HAP、HPP、HPI分别为85.54ml/100ml/min、75.34ml/100ml/min、58.03％。HCC组癌组织的HAP及HPI较正常对照组肝组织明显增高（P＜0.01），HPP较正常对照组肝组织明显降低（P＜0.01）。
　　2.HCC组癌组织中CD105过表达，本实验中采用CD105标记MVD，HCC组癌组织的MVD与正常对照组肝组织的MVD的差异有统计学意义（P＜0.01）。
　　3.HCC组癌组织的HAP、HPI与MVD呈正相关（r值分别为0.600、0.648，P＜0.01）;HCC组癌组织的HPP与MVD无相关性(r=-0.182, P=0.336)。
　　4.HCC组癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4过表达，其表达与正常对照组肝组织中的表达的差异有统计学意义(P＜0.01);HCC组癌组织中E-cadherin表达降低，其表达与正常对照组肝组织中的表达的差异有统计学意义(P＜0.01)。
　　5.HCC组癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4的表达与MVD正相关(r值分别为0.697、0.764、0.641、0.597，P＜0.01); HCC组癌组织中E-cadherin的表达与MVD无相关性（r=-0.199，P=0.291）。
　　6.HCC组癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4的表达与HAP正相关（r值分别为0.430、0.551、0.582、0.615，P＜0.05）;HCC组癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4的表达与HPI正相关(r值分别为0.371、0.621、0.442、0.536，P＜0.05); HCC组癌组织中E-cadherin的表达与HAP、HPI无相关性（r值分别为-0.301、-0.273，P值分别为0.106、0.145）。HCC组癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、E-cadherin、PAK4表达各组间的HPP比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　7.HCC的病理分级与癌组织的MVD正相关（r=0.896，P＜0.01）;HCC组癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4的表达与病理分级正相关（r值分别为0.615、0.741、0.675、0.768，P＜0.01），E-cadherin的表达与病理分级无相关性（r=-0.289，P=0.122）;HCC的病理分级与HAP、HPI正相关（r值分别为0.873、0.868，P＜0.01）。
　　8.HCC组癌组织中Snail-2与Twist-1的表达正相关(r=0.660，P＜0.01); HCC组癌组织中Snail-2、Twist-1的表达与E-cadherin的表达无相关性（r值分别为-0.133、-0.193，P值分别为0.484、0.306）。
　　结论:
　　1.320排CT全肝灌注成像获得的灌注参数可以定量反映HCC的血流动力学改变。其中灌注参数HAP、HPI可以在一定程度上反映HCC肿瘤微血管密度及病理分化程度，可望为在活体无创性评价HCC肿瘤血管生成及肿瘤恶性程度提供一条新途径。
　　2.HCC癌组织中存在Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4的过表达，且其表达水平与肿瘤微血管密度正相关，提示其可能参与肿瘤新生血管的形成。而HCC癌组织中Ang-2、Snail-2、Twist-1、PAK4的表达水平与肿瘤病理分级及肿瘤CT灌注参数HAP、HPI之间存在一定程度的相关性，提示其与肿瘤的恶性程度等生物学行为相关，并可能通过肿瘤CT灌注参数的变化得到一定程度的反映。