核酸-十六烷基三甲基溴化铵-阴离子染料三元体系的RLS光谱研究与应用

摘要

本论文在查阅大量文献的基础上，根据实验室的实验条件，选择共振光散射光谱法研究核酸与有机阴离子小分子之间的相互作用前后的共振光散射光谱特征，在最佳实验条件下，根据共振光散射光谱信号的改变值与核酸的浓度在一定的范围内呈良好的线性关系，建立了几种测定核酸的新方法。这些方法快速、具有较高的灵敏度和准确度，应用于合成样品中核酸的测定，结果令人满意。
　　 本论文共分为五章。
　　 第一章概述了核酸的研究进展，共振光散射技术的原理和定量分析基础，及其在核酸研究和分析中的应用。
　　 第二章研究了阴离子染料铬天青S(CAS)-阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)-核酸三元体系的共振光散射光谱特性及其分析应用,并采用相对粘度法初步探讨了其反应机理,建立了一种测定钠克级核酸的新方法。在pH=4.50～6.00的条件下，铬天青S对核酸与阳离子表面活性剂CTMAB的共振光散射光谱有协同增强作用，并在548nm处达到最大。在最佳反应条件下，增强的△IRLS与yDNA在0.05-0.80mg/L和1.00-2.00mg/L的浓度范围内呈线性关系，其线性回归方程分别为△I=2.556+0.482C（C：mg/L）和△I=17.86+0.141C（C：mg/L），相关系数分别为0.9997和0.9991，yDNA检测限为4.3ng/mL。
　　 第三章研究了阴离子染料靛蓝胭脂红(IC)-阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)-核酸三元体系的共振光散射光谱特性及其分析应用，并采用相对粘度法初步探讨了其反应机理，建立了一种测定钠克级核酸的新方法。在pH=4.80～6.50的条件下，靛蓝胭脂红对核酸与阳离子表面活性剂CTMAB的共振光散射光谱有协同增强作用，并在336nm处达到最大。在最佳反应条件下，增强的△IRLS与yDNA、fsDNA、ctDNA和RNA分别在0-2.50 mg/L，0.05-2.00 mg/L，0.12-2.20 mg/L和0.10-2.30 mg/L范围内呈良好的线性关系，线性方程分别为△I=0.3942C+0.1235（C：mg/L）,△I=0.3419C+6.9366（C：mg/L）,△I=0.3226C-1.1559（C：mg/L）和△I=0.3211C+25.143（C：mg/L），检测限最低可达4.10ng/mL。
　　 第四章研究了阴离子染料酸性铬蓝K(ACBK)-阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)-核酸三元体系的共振光散射光谱特性及其分析应用，并采用相对粘度法初步探讨了其反应机理，建立了一种测定钠克级核酸的新方法。在pH=7.00～8.00的条件下，酸性铬蓝K对核酸与阳离子表面活性剂CTMAB的共振光散射光谱有协同增强作用，并在335nm处达到最大。在最佳反应条件下，体系的△IRLS与yDNA、ctDNA、fsDNA和RNA在一定的浓度范围内呈线性关系，检测限最低可达7.52ng/mL。
　　 第五章研究了阴离子染料溴酚蓝(BPB)-阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)-核酸三元体系的共振光散射光谱特性及其分析应用，并采用吸收光谱法和相对粘度法初步探讨了其反应机理,建立了一种测定钠克级核酸的新方法。在pH=6.00～9.00的条件下，溴酚蓝对核酸与阳离子表面活性剂CTMAB的共振光散射光谱有协同增强作用，并在620nm处达到最大。在最佳反应条件下，增强的△IRLS与yDNA、fsDNA、ctDNA和RNA分别在0-1.80 mg/L，0-1.70 mg/L，0.10-1.50 mg/L和0.50-1.50 mg/L范围内呈良好的线性关系,线性方程分别为△I=6.532+0.371C（C：mg/L）,△I=-8.370+0.274C（C：mg/L），△I=11.764+0.207C（C；mg/L）和△I=26.803+0.117C（C：mg/L），检测限最低可达0.73ng/mL。