维生素C对宫颈癌Hela细胞生长及顺铂敏感性的影响

摘要

目的:探讨维生素C单独或和顺铂联合应用时对人宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法:分别或联合应用不同浓度的维生素C、顺铂作用于人宫颈癌Hela细胞株,用MTT比色法分析细胞生长抑制作用,用流式细胞术测定各组细胞周期分布和凋亡率.对不同浓度维生素C单独作用的Hela细胞,以免疫组化法检测其HPV18 E6、Bax、Bcl-2蛋白的表达情况,以间接免疫荧光法流式细胞术测定HPV18 E6、p53、Bax、Bcl-2蛋白的表达,以TRAP-PCR-ELISA法和TRAP-PCR-PAGE银染法测定端粒酶活性.结果:维生素C能以浓度依赖和时间依赖方式阻滞Hela细胞于G<,0>/G<,1>期,显著抑制其生长并诱导凋亡.其原因在于病毒癌基因E6表达的降低,以及由此而引起的细胞内蛋白表达水平的改变,包括HPV18 E6、Bcl-2蛋白表达的下调,wtp53、Bax蛋白表达的上调,同时端粒酶活性降低.它和顺铂联合作用时提高了细胞的凋亡率,有明显的协同作用.结论:(1)维生素C可显著抑制Hela细胞生长,使其细胞周期阻滞于G<,0>/G<,1>期,并诱导其凋亡;(2)维生素C可下调Hela细胞中HPV18 E6、Bcl-2蛋白的表达,上调wtp53、Bax蛋白的表达;(3)维生素C可降低Hela细胞的端粒酶活性;(4)维生素C能够增加顺铂对Hela细胞的抑制作用,增加其凋亡率.

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实验方法

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结论

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致谢

综述 大剂量维生素C治疗恶性肿瘤的研究进展