HDL和HDL对THP-1巨噬细胞脂质蓄积及相关蛋白表达的影响

摘要

目的研究HDL<,2>和HDL<,3>对THP-1巨噬细胞胆固醇蓄积及相关蛋白CD36、SR-BI和PPAR γ表达的影响方法取新鲜抗凝血浆,用超速离心法进行密度梯度离心,收集LDL、HDL<,2>、HDL<,3>.将LDL置于含10μmol/LCuSO4的PBS溶液(pH7.2)中,37℃温育24h.氧化修饰后的LDL置含200μmol/l EDTA的PBS中透析24h.本实验分为两部分,前一部分以研究HDL<,2>和HDL<,3>能否限制THP-1巨噬细胞胆固醇的蓄积,及其对相关蛋白的影响为目的.HDL<,2>、HDL<,3>与OxLDL共育,或分别单独应用孵育细胞.第二部分主要观测HDL<,2>和HDL<,3>对THP-1巨噬细胞内异常蓄积的脂质有何影响,同时检测相关蛋白的变化.HDL<,2>、HDL<,3>处理经OxLDL诱导过的细胞.用油红0染色及高效液相色谱分析法观测细胞内脂质蓄积程度;用逆转录聚合酶链反应检测CD36、SR-BI和PPAR γ mRNA的表达;用Western Blotting检测CCD36、SR-BI和PPAR γ的蛋白表达.结论1.HDL<,2>和HDL<,3>可以减少THP-1巨噬细胞内脂质蓄积,HDL<,3>的作用强于HDL<,2> 2.HDL<,2>和HDL<,3>可以抑制CD36的表达,HDL<,3>对CD36的抑制作用强于HDL<,2>.3.HDL<,2>和HDL<,3>可以促进OxLDL诱导的巨噬细胞内胆固醇蓄积降低,HDL<,3>的作用强于HDL<,2>.4.HDL<,2>和HDL<,3>可能可以上调SR-B1的表达,HDL<,3>的这一作用比HDL<,2>强.

目录

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主要缩略语英文索引

前言

实验材料

实验方法

实验结果

1.HDL2和HDL3对THP-1巨噬细胞脂质蓄积的影响

2.HDL2和HDL3对THP-1巨噬细胞中CD36表达的影响

3.HDL2和HDL3对THP-1巨噬细胞中SR-BI表达的影响

4.HDL2和HDL3对THP-1巨噬细胞中PPAR γ表达的影响

讨论

结论

参考文献

综述高密度脂蛋白和胆固醇转运

硕士期间发表的论文

致谢