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【6h】

坐骨神经雪旺氏细胞核酸降解与死亡时间关系的研究

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前言

材料和方法

1.1 材料

1.2 方法

结果

2.1 甲基绿派洛宁染色结果

2.2 雪旺氏细胞核酸物质各参数的表达值

2.3 直线回归分析

2.4 相关性分析

讨论

核酸物质在推断PMI中的地位

甲基绿派罗宁是同时显示DNA和RNA的理想染料

图像分析技术的关键就是图像分析

坐骨神经是推断死亡时间理想的检材

实验动物的性别问题

结论

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:观察在死后不同时间点,坐骨神经雪旺氏细胞核酸物质的降解。分析死后坐骨神经雪旺氏细胞内核酸的降解与死亡时间的关系。
  方法:将27只SD大鼠根据死后不同时间点(0h对照组、6h、12h、18、24h、36h、48h、60h、72h),随机分为9组,每组3只坐骨神经。在不同时间点取相应组的坐骨神经。用甲基绿派罗宁染色方法进行染色。
  结果:纵切面:细胞核着明显蓝绿色,胞核形态结构完整、饱满、呈粗长的梭形,胞核面积占细胞面积的2/3,胞浆着明显红色。着色细胞数目均匀遍布任意一个视野,每个高倍视野(×40)细胞数目约20-30;坐骨神经横切面上雪旺氏细胞内核酸的着色情况、形态大小及细胞的数目不易统计和分析。
  6-12小时:细胞核着色、结构形态变化轻微,细胞数目有所减少但变化不明显,但是胞浆的红色但变窄,且着色不再明显;18-48小时:视野细胞数目明显减少,大约每高倍视野10-20个,18小时的核染色变淡,到48小时时细胞核着色模糊,体积变小,从长梭形逐渐变成了细线条形,但局部区域仍可见结构清晰细胞;60-72小时:小部分视野区域仍可见结构清晰细胞核,每高倍视野约8-10个。剩余区域细胞核染色清淡、结构模糊。
  神经平均目标面积的直线回归方程:Y=98.046-5.265X, R2=0.82, P<0.01;神经平均灰度的直线回归方程:Y=203.270-5.873X, R2=0.711, P<0.01;平均光密度的直线回归方程:Y=0.203-0.010X, R2=0.509, P<0.01。神经平均目标面积与死亡时间的相关性最好,R2最大。
  结论:72h内坐骨神经雪旺氏细胞内核酸的降解规律与PMI有相关性。坐骨神经雪旺氏细胞核酸平均目标面积与死亡时间的相关性最好,直线回归方程如下:Y=98.046-5.265X,R2=0.821,p<0.01。

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