原花青素对反式脂肪酸致雄性小鼠生殖毒性的保护作用

摘要

目的：
　　1.观察不同剂量反式脂肪酸（Trans Fatty Acids，TFA）对雄性小鼠的生殖毒性作用；
　　2.初步探讨原花青素（proanthocyanidins,PC）对反式脂肪酸致雄性小鼠生殖损伤保护效果及可能机制,为评价PC对TFA致生殖损伤的保护作用提供实验依据。
　　方法：
　　以TFA和PC为受试物，以健康成年昆明（KM）种雄性小鼠为实验对象。将96只小鼠随机分为8组：对照组、低、中、高剂量TFA染毒组、PC对照组、L-TFA+PC保护组、M-TFA+PC保护组、H-TFA+PC保护组；3个剂量TFA染毒组：分别按低（TFA25 mg/kg）、中（TFA50 mg/kg）、高（TFA100 mg/kg）TFA染毒剂量给小鼠灌胃90天，隔天一次，上午灌胃TFA、下午灌胃等量的生理盐水；3个PC保护组：染毒剂量、时间同染毒组，上午灌胃TFA、下午每组灌胃同剂量的（100mg/kg）PC；对照组灌胃生理盐水、PC组灌胃（100mg/kg）PC。各组动物灌胃体积为10ml/kg．bw。实验结束后取血处死动物，取睾丸、附睾和肾脏分别称重并计算其脏器系数；常规病理学切片，HE染色观察睾丸病理形态变化；光学显微镜下观察精子质量的改变；全自动生化分析仪检测血清T、LH、FSH水平；试剂盒测定MDA、SOD、GSH-Px酶的活性。
　　结果：
　　1．中、高剂量TFA染毒组小鼠末体重及净增体重明显高于对照组，经PC保护的高剂量TFA染毒组动物的净增体重低于同剂量染毒组（P＜0.05）。
　　2．高剂量TFA染毒组小鼠睾丸脏器系数低于对照组，经PC保护的高剂量TFA染毒组睾丸脏器系数低于同剂量染毒组（P＜0.05）；PC对其它各染毒组睾丸、附睾及肾脏脏器系数影响不大，差异无显著性（P＞0.05）。
　　3．睾丸病理形态显示:对照组小鼠睾丸曲细精管完整，上皮细胞层次正常，管腔中见到大量成熟精子等；TFA染毒组睾丸组织基底膜模糊不清、核间隙增宽，部分管壁脱落缺失，腔内未见精子等；给予PC保护后，睾丸组织形态较TFA染毒组有所改善，以低、中剂量TFA染毒组改善较明显，睾丸间质有所缩小，间质细胞颗粒减少，各级生精细胞数量有所增加，曲细精管上皮细胞层次趋向正常，腔内精子较多。
　　4．与对照组比较，中、高剂量TFA染毒组小鼠精子数量、精子存活率、精子活力均降低，畸形率增加（P＜0.05）；经PC保护的中、高剂量TFA染毒组精子数量、精子存活率、精子活力均有不同程度的增加，畸形率减少与相同剂量染毒组比较，差别有显著性（P＜0.05）；精子畸形以尾折叠、卷尾、尾体弯曲、不规则精子、双尾精子为主。
　　5．高剂量TFA染毒组小鼠血清FSH、LH、T值均低于对照组（P＜0.05）；经PC保护的高剂量TFA染毒组FSH、LH、T值均较同剂量的染毒组有不同程度的增加，差别有显著性（P＜0.05）。
　　6．高剂量 TFA染毒组小鼠睾丸 LDH-X、GGT的活性均低于对照组（P＜0.05）；经PC保护高剂量TFA染毒组LDH-X、GGT活性均较同剂量的染毒组有不同程度的增加（恢复），差别有显著性（P＜0.05），其它各组对其酶的活性影响不明显（P＞0.05）。
　　7．与对照组比较，中、高剂量 TFA染毒组小鼠睾丸 MDA含量增加，SOD、GSH-Px活性降低（P＜0.05)；高剂量TFA染毒组CAT活性低于对照组(P＜0.05)；经PC保护的高剂量TFA染毒组小鼠睾丸SOD、GSH-Px、CAT活性均较同剂量的染毒组增加（P＜0.05）；PC保护的中剂量TFA染毒组睾丸GSH-Px活性高于同剂量的染毒组（P＜0.05）；其它各组酶的活性及氧化产物MDA含量影响不明显（P＞0.05）。
　　结论：
　　1.不同剂量反式脂肪酸（TFA）亚慢性染毒雄性小鼠可致生殖系统损伤，高剂量TFA对生殖功能损伤严重。
　　2.采用100mg/kg.bw剂量原花表素（PC）可修复TFA致雄性小鼠生殖系统的损伤作用；
　　3.抗氧化作用是PC保护（修复）TFA所致雄性生殖损伤的重要机制之一。

目录

封面

声明

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中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计分析方法

结果

1 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠体重变化的影响

2 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠脏器系数的影响

3 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠睾丸组织形态学的影响

4 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠精子质量的影响

5 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠血清FSH、LH和T值水平的影响

6 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠睾丸LDH-X及GGT的影响

7 原花青素对反式脂肪酸染毒小鼠MDA、SOD、GSH-Px、CAT的影响

讨论

1 原花青素对反式脂肪酸致小鼠体重的影响

2 原花青素对反式脂肪酸致小鼠脏器系数的影响

3原花青素对反式脂肪酸致雄性小鼠性激素的影响

4 原花青素对反式脂肪酸致小鼠精子质量的影响

5 原花青素对反式脂肪酸致小鼠睾丸组织病理改变的影响

6 原花青素对反式脂肪酸致小鼠睾丸LDH-X及GGT酶活性的影响

7 原花青素对反式脂肪酸致小鼠脂质过氧化的影响

8 问题和研究展望

结论

参考文献

附录

综述

研究生期间已发表的论文

参与的课题

致谢