体内培养下兔半月板碎块大小与组织生物活性关系的研究

摘要

目的：1.建立半月板碎块皮下培养模型的可行性分析；
　　2.观察体内皮下培养下兔半月板不同大小的碎块与其生物活性的关系。
　　方法：1、取健康成年新西兰大白兔72只,6月龄,随机分为3组，每组24只新西兰大白兔；
　　2、无菌条件下分别取其相同体积及重量的自体成年半月板中内2/3区域组织，分别加工成 a组0.5mm*0.5mm*0.5mm、b组1mm*1mm*1mm、 c组2mm*2mm*2mm大小均匀的碎块，PGA/PLA复合膜包裹后自体皮下培养；
　　3、于培养的第0、1、2、3周各任选6只新西兰大白兔取出半月板碎块与PGA/PLA复合模型,高渗盐水冲洗3次,10％福尔马林固定48小时,石蜡包埋,切片,厚度4-6/um,I型胶原及II型胶原免疫组织化学染色观察；
　　4、于培养的第0、1、2、3周各任选6只新西兰大白兔取出半月板碎块与PGA/PLA复合模型,高渗盐水冲洗3次,10%福尔马林固定48小时,石蜡包埋,切片,厚度4-6/um,HE染色观察；
　　5、于培养的第0、1、2、3周各任选6只新西兰大白兔取出半月板碎块与PGA/PLA复合模型,高渗盐水冲洗3次,10%福尔马林固定48小时,石蜡包埋,切片,厚度4-6/um,番红O染色观察。
　　结果：1.培养3周时，a组HE染色显示半月板碎块中心区域纤维软骨细胞逐渐向周围迁移。
　　2、随着培养时间的延长，番红O染色图像分析结果显示，a组、b组和c组标本的番红O染色程度都逐渐变淡；培养3周时，a组番红O染色程度相对其他两组颜色深，有统计学意义（P﹤0.05），b组和c组染色程度相当，无统计学意义（P>0.05）；
　　3、随着培养时间的延长，II型胶原免疫组织化学染色的灰度值呈上升趋势，I型胶原免疫组织化学染色的灰度值呈下降的趋势；
　　4、培养3周时，a组II型胶原免疫组织化学染色相对其他两组，灰度值减少，有统计学意义（P﹤0.05）；
　　5、培养3周时，a组I型胶原免疫组织化学染色相对其他两组，灰度值减少，有统计学意义（P﹤0.05）。
　　结论：1、成功建立成功建立半月板碎块皮下培养模型；并随着体内培养时间的延长，半月板组织内 I型胶原的合成代谢呈上升的趋势，II型胶原和蛋白多糖呈下降的趋势；
　　2、体内皮下培养环境下，半月板碎块越小其组织的合成代谢能力越强。

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