自体半月板碎块法移植修复兔半月板无血运区损伤的体内实验研究

摘要

目的：通过建立成年新西兰大白兔半月板无血运区损伤模型，观察体内自体半月板碎块法移植修复成年兔半月板无血运区损伤的疗效。
　　方法：选取6月龄成年新西兰大白兔32只，平均体重3.0Kg(2.6Kg～3.5Kg)雌雄不限，64膝随机编号分为2组，每组32膝。选取外侧半月板前角及体部内侧2/3部位，建立1mm×4mm全层缺损模型。对照组：取出半月板组织整块原位填塞于缺损处，并用自体肌筋膜包裹。实验组：取出的自体半月板加工成0.5mm×0.5mm×0.5mm大小的碎块，填塞于缺损处并用自体肌筋膜包裹。分别在术后2周、4周、8周、12周在各组随机取出8个外侧半月板标本，进行大体标本观察、组织学HE染色、PCNA免疫组化、胶原蛋白免疫组化、II型胶原蛋白免疫组化观察，并进行半定量评分，测定平均灰度值判断PCNA、胶原蛋白、II型胶原蛋白表达情况。所采集的计量资料数据用x±s表示，采用独立样本t检验或者方差不齐的t＇检验，组内各时间点两两比较采用SNK-q检验进行统计分析。计数资料采用秩转换的非参数Mann-Whitney U检验或者Kruskal-Wallis H检验进行统计分析。应用SPSS18.0统计软件进行分析，检验水准α=0.05，以P<0.05为有统计学意义。
　　结果：
　　1．大体观察和愈合程度比较
　　在术后各时间点标本大体观察结果显示：术后2周两组大体标本观察愈合情况比较，P>0.05，无统计学意义；术后4周、8周、12周时两组大体标本观察愈合情况比较P<0.05，有统计学意义。Kruskal-Wallis H法对对照组、实验组在组内各时间点的两两比较结果显示：对照组各时间点的愈合程度比较无统计学意义，P>0.05,而实验组的愈合程度随着时间的延长而增加，P<0.05,有统计学意义。
　　2．组织评估
　　2.1、HE染色
　　组织学半定量得分：术后2周时实验组与对照组比较，P＞0.05。术后4周、8周、12周时实验组与对照组比较，P<0.05，两组之间有统计学意义。Mann-Whitney U检验法在术后2周实验组与对照组比较，P＞0.05。术后4周、8周、12周时实验组与对照组比较，均P<0.05，两组之间有统计学意义。Kruskal-Wallis H检验法对对照组组内各时间点的比较，虽然标本得分随着时间的延长而增加，但P＞0.05，无统计学意义。Kruskal-Wallis H检验法在实验组组内各时间点的比较：标本得分随着时间的延长而增加，P<0.05，有统计学意义。
　　3、增殖细胞核抗原（PCNA）、I型胶原蛋白和II型胶原蛋白免疫组化评估细胞增殖、生物活性
　　3.1、PCNA免疫组化
　　PCNA免疫组化平均灰度值比较：术后2、4、8周实验组平均灰度值与对照组比较，P<0.05，有统计学意义。而术后12周实验组平均灰度值与对照组比较， P>0.05，无统计学意义。对照组术后2周PCNA免疫组化平均灰度值与术后12周比较无统计学意义（P=0.224），其余各时间点PCNA免疫组化平均灰度值两两比较均有统计学意义，P＜0.05；术后实验组各时间点PCNA免疫组化平均灰度值两两比较均有统计学意义，P＜0.05。
　　3.2、I型胶原蛋白免疫组化
　　I型胶原蛋白免疫组化平均灰度值比较：术后2、4、8、12周实验组I型胶原蛋白免疫组化平均灰度值分别与对照组比较，P<0.05，有统计学意义；对照组术后各时间点I型胶原蛋白免疫组化平均灰度值两两比较均有统计学意义，P＜0.05；实验组术后各时间点I型胶原蛋白免疫组化平均灰度值比较有统计学意义，P＜0.05。
　　3.3、II型胶原蛋白免疫组化
　　II型胶原蛋白免疫组化平均灰度值比较：术后2、4、8、12周实验组II型胶原蛋白免疫组化平均灰度值分别与对照组比较，P<0.05，有统计学意义；对照组术后8周II型胶原蛋白免疫组化平均灰度值与术后12周比较无统计学意义（P=0.071），其余术后各时间点II型胶原蛋白免疫组化平均灰度值两两比较均有统计学意义，P＜0.05；实验组术后8周II型胶原蛋白免疫组化平均灰度值与术后12周比较无统计学意义（P=0.065），其余各时间点II型胶原蛋白免疫组化平均灰度值两两比较均有统计学意义，P＜0.05。
　　结论：自体半月板碎块法移植能促进兔半月板无血运区损伤的修复。

目录

封面

声明

目录

主要英文缩略语索引

中文摘要

英文摘要

前言

材料及方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

综述

硕士期间发表的文章

致谢