金樱子对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡影响的实验研究

摘要

目的:研究金樱子(Rosa Laevigata Michx,RLM)对糖尿病大鼠晶状体上皮细胞(Lens epithelial cells,LECs)凋亡的抑制作用,为药物治疗糖尿病性白内障提供理论基础和实验依据。
　　研究方法:将60只SD大鼠,按随机分组原则分为3组,即空白对照组、糖尿病模型组和金樱子治疗组。用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱发糖尿病性白内障,每4周观察晶状体的变化。在实验开始后4周末、8周末、12周末,分别取眼球。采用 DNA缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)检测晶状体上皮细胞凋亡,免疫组化染色检测晶状体上皮细胞 bcl-2、bax蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测bcl-2、bax基因的表达,并利用图像分析系统测量积分吸光度值进行半定量分析。
　　结果:1、晶状体混浊情况显示随饲养时间延长,金樱子治疗组晶状体混浊程度明显轻于糖尿病模型组(P<0.05)。2、TUNEL检测发现,金樱子治疗组各时限凋亡率均明显低于糖尿病模型组(P<0.05)。3、免疫组化观察,bcl-2和bax在正常晶状体上皮细胞中均有表达,bcl-2的表达远较bax高;糖尿病模型组bcl-2表达显著下调,bax表达显著上调,bcl-2/bax比率下降;金樱子治疗组可明显上调bcl-2蛋白表达,下调bax蛋白表达,bcl-2/bax比率上升,与糖尿病模型组比较差异有显著意义。4、逆转录聚合酶链反应检测观察,糖尿病模型组bcl-2 mRNA表达显著下调,bax mRNA表达显著上调,bcl-2/bax比率下降;金樱子治疗组可明显上调bcl-2 mRNA表达,下调bax mRNA表达,bcl-2/bax比率上升。
　　结论:金樱子在一定的剂量和时间范围内可能通过抑制STZ诱导的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡,延缓和减轻其糖尿病性白内障的发生和发展。

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中文摘要

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前言

材料和方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学分析

结果

1 血糖体重情况

2 晶状体的混浊度观察

3 晶状体组织学改变

4 晶状体上皮细胞凋亡情况

5 Bcl-2、Bax蛋白表达情况

6 Bcl-2、Bax基因表达情况

讨论

1、糖尿病性白内障模型的建立

2、糖尿病性白内障与LECs凋亡

3、晶状体上皮细胞凋亡的调控机制

4、金樱子对糖尿病性白内障LECs凋亡的保护作用

结论

参考文献

附录

文献综述

参考文献

成果目录

致谢