黄连素联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨

摘要

目的：
　　探讨黄连素与顺铂及两药联合对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及可能机制。
　　方法：
　　1、取对数生长期的肺癌A549细胞，分为对照组、黄连素组、顺铂组及两药联合组，对照组加入F12培养液，黄连素组分别加入10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L黄连素，顺铂组分别加入1mg/L、2mg/L、4mg/L顺铂，联合组分别加入10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L黄连素与2mg/L顺铂，采用四甲基偶氮唑盐法检测黄连素、顺铂及两药联合对细胞增殖的影响；
　　2、取对数生长期的肺癌A549细胞，分为对照组、黄连素组、顺铂组、联合组，对照组加入 F12培养基，黄连素组加入25μmol/L黄连素，顺铂组加入2mg/L顺铂，联合组加入25μmol/L黄连素+2mg/L顺铂，用流式细胞术分析黄连素、顺铂及两药联合对细胞凋亡的影响；逆转录-聚合酶链式反应术和免疫印迹法检测黄连素、顺铂及两药联合对人肺癌A549细胞凋亡因子Survivin、Bcl-2、Bax表达的影响。
　　结果：
　　1、黄连素组、顺铂组的增殖抑制率高于对照组（P<0.01），随黄连素、顺铂浓度的增高，增殖抑制率增加（P<0.01）,随作用时间的延长，增殖抑制率增加（P<0.01）;联合组的增殖抑制率高于黄连素组、顺铂组，差异具有统计学意义（P<0.01）。
　　2、流式细胞术检测处理24小时后的肿瘤细胞，与对照组相比，黄连素组G1期细胞比例增加，顺铂组S期细胞比例增加，联合组G1期、S期细胞比例均增加，差异均具有统计学意义（P<0.01）；与对照组相比，联合组的细胞凋亡率高于黄连素组、顺铂组，差异具有统计学意义（P<0.01）。
　　3、黄连素组、顺铂组、联合组Survivin、Bcl-2 mRNA的表达低于对照组，Bax mRNA的表达高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.01）,联合组Survivin、Bcl-2 mRNA的表达低于黄连素组、顺铂组，Bax mRNA的表达高于黄连素组、顺铂组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
　　4、黄连素组、顺铂组、联合组Survivin、Bcl-2蛋白的表达低于对照组，Bax蛋白的表达高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）,联合组Survivin、Bcl-2蛋白的表达低于黄连素组、顺铂组，Bax蛋白的表达高于黄连素组、顺铂组，差异具有统计学意义（P<0.05）。
　　结论：
　　1、黄连素与顺铂均能抑制人肺癌A549细胞的增殖，且呈浓度时间依赖性，两者联合后效果更佳；
　　2、黄连素可协同顺铂诱导人肺癌A549细胞凋亡，其作用机制可能与上调Bax的表达，下调Bcl-2、Survivin的表达相关。

目录

声明

主要缩略语英文索引

第1章 前言

第2章 实验材料及方法

2.1 实验材料

2.2 实验方法

第3章 实验结果

3.1黄连素、顺铂及两药联合对肺癌A549细胞增殖的影响

3.2黄连素联合顺铂对肺癌A549细胞增殖的影响的效果评价

3.3黄连素联合顺铂对人肺癌A549细胞周期和凋亡的影响

3.4黄连素联合顺铂对人肺癌A549细胞Survivin、Bcl-2、Bax mRNA表达水平的影响

3.5黄连素联合顺铂对人肺癌A549细胞Survivin、Bcl-2、Bax 蛋白表达水平的影响

第4章 讨论

1 黄连素与顺铂对肺癌A549细胞增殖的影响

2 黄连素与顺铂对肺癌A549细胞凋亡的影响

3 黄连素与顺铂对肺癌A549细胞Survivin表达的影响

4 黄连素与顺铂对肺癌A549细胞Bcl-2、Bax表达的影响

5 黄连素与顺铂联用的效果评价

第5章 结论

参考文献

文献综述:黄连素诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

硕士期间研究成果

致谢