人参皂苷脂肪酸结构修饰与体外抗肿瘤活性研究

摘要

研究发现人参有抗肿瘤作用，其主要活性成分是人参多糖和人参皂苷。人参多糖的抗肿瘤作用可能是通过调节机体免疫功能实现的。人参皂苷的抗肿瘤作用及机制较为广泛，其抗肿瘤机制可能是增强机体免疫力，抑制或杀伤肿瘤细胞。其抗肿瘤作用的最大优势是毒副作用很小。人参皂苷口服或静脉注射后，在体内以脂肪酸酯的形式被吸收。药理实验表明人参皂苷脂肪酸酯的抗肿瘤活性强于人参皂苷。本实验根据上述机理，对人参皂苷进行脂肪酸结构修饰，以增加其抗肿瘤活性。 本实验采用ODS反相柱层析甲醇梯度洗脱分离人参茎叶总皂苷，60％甲醇洗脱部分直接获得单体人参皂苷Rd。人参皂苷Re、Rg<,1>集中在20％-30％的甲醇洗脱部分。用ODS反相填料容易富集到目标化合物，即二醇型皂苷、三醇型皂苷两部分。通过硅胶柱层析分离得到人参皂苷Rg<,1>、Re，对他们进行了物理、化学及高效液相色谱分析，确定了结构。单体人参皂苷的获得是本实验研究脂肪酸修饰的前提。 本实验根据人参皂苷肠内菌代谢机理，前人研究体外合成人参皂苷脂肪酸酯的基础上，对单体人参皂苷Rg<,1>、Re进行体外棕榈酸酰基结构修饰研究，得到两种酯化产物，分别为人参皂苷Rg<,1>棕榈酸二酯和3β，6α，12β-三棕榈酸酰基-20(22)，24-二烯-原人参三醇。方法是人参皂苷Rg<,1>和棕榈酸酰氯按照一定比例混合，吡啶为溶媒，加热反应3小时后，浓缩回收溶剂得到黄色物质。黄色物质经硅胶柱层析，氯仿-甲醇-水梯度洗脱，得到化合物Ⅰ。化合物Ⅰ经常规化学方法和现代波谱手段确定其结构为RG<,1>棕榈酸二酯。同时该反应中也获得副产物人参皂苷Rh<,1>。采用反相高效液相色谱法测定了人参皂苷Rg<,1>棕榈酸二酯的转化率，转化率结果为11.3％。高效液相色谱条件是40％乙腈等度洗脱，人参皂苷Rg<,1>棕榈酸二酯与其它产物可达到基线分离。方法学考察结果表明该方法测定转化率可靠、稳定。 Re和棕榈酸酰氯按照一定比例混合，氯仿为溶剂，加热一定时间，得到褐色物质。硅胶柱层析，石油醚一乙酸乙酯梯度洗脱，分离得到化合物Ⅱ，经常规化学方法和现代波谱手段确定其结构为3β，6α，12β-三棕榈酸酰基-20(22)，24-二烯-原人参三醇。 本实验对两种酯化产物进行体外抗肿瘤活性研究。采用MTT法检测两种酯化产物对肿瘤细胞的抑制作用。结果表明两种化合物对MFC胃癌细胞有不同程度的杀伤作用。 本文研究了ODS填料分离、纯化人参茎叶总皂苷的方法；人参皂苷的酯化反应及产物的分离、结构鉴定；以及人参皂苷酯化产物的体外抗肿瘤实验研究。此项研究为人参皂苷抗癌新药的研发与创新奠定更加坚实的理论基础。由于人参皂苷不仅可抑制或杀伤肿瘤细胞，还可以提高机体免疫力，无疑是预防和治疗癌症的首选药物。低极性的人参皂苷及其衍生物有较强药用价值和应用前景。

目录

文摘

英文文摘

第一章绪论

1.1人参皂苷类成分的研究进展

1.2人参皂苷结构修饰的研究进展

1.3人参皂苷抗肿瘤作用的研究进展

第二章酯化底物人参单体皂苷的制备

2.1实验材料、仪器、试剂

2.2人参单体皂苷Rd，Re，Rg1的分离、纯化

2.3人参单体皂苷的结构鉴定

2.4讨论

第三章人参皂苷Rg1脂肪酸酯的合成与转化率的研究

3.1人参皂苷Rg1脂肪酸酯的合成

3.2化合物A的结构鉴定

3.3人参皂苷Rg1棕榈酸二酯转化产物的高效液相色谱分析

3.4化合物B的结构鉴定

3.5讨论

第四章人参三醇型苷元三酯的合成

4.1人参三醇型苷元三酯的合成

4.2化合物C的结构鉴定

4.3讨论

第五章人参皂苷脂肪酸酯体外抗肿瘤活性的研究

5.1实验材料、仪器

5.2实验方法

5.3实验结果

第六章结论

参考文献

致谢

作者简历