水貂自咬症分子诊断的初步研究

摘要

貂皮素有“东北三宝”之一的美誉。水貂全身都是宝，具有较高的经济价值，尤其是貂皮也享有“裘皮之王”的美称。所以水貂的毛皮质量直接影响水貂的经济价值，水貂的自咬行为已经成为破坏水貂毛皮质量的主要原因，然而其发病原因一直是个难题，众说纷纭，一直没有得到根本的解决。 本研究主要通过120个水貂样本寻找影响水貂自咬症行为的分子标记，以发现患病与正常水貂的差别，主要采用RAPD结合SCAR的方法进行检测，将其真正在生产实践中得以应用。此标记方法在植物中研究广泛，在动物中研究甚少，在水貂研究中更是一片空白。本研究通过对用RAPD-SCAR方法对自咬水貂与健康水貂进行检测，发现其标记差异。 本试验主要从以下几个方面进行研究： (1)用RAPD方法对自咬水貂与健康水貂进行检测，发现其标记差异。 (2)用SCAR标记方法对自咬水貂特异片段进行克隆测序。 (3)用SCAR标记方法对健康水貂特异片段进行克隆测序。 (4)用SCAR标记方法设计的引物对大连地区的水貂进行检测。 (5)用SCAR标记方法设计的引物对大兴安岭地区的水貂进行检测。 主要研究结果如下： (1)首次对混合DNA样本进行RAPD标记，发现了与水貂自咬症相关联的RAPD标记，分别命名为DS103-900，HS103-700。 (2)首次应用RAPD结合SCAR的标记方法，对自咬水貂和健康水貂的特异片段进行克隆测序，片段长度分别为905bp和655bp。 (3)成功将RAPD标记转化成了SCAR标记，阳性率为86.7％。 (4)初步判断DS103-900标记序列是自咬水貂基因组中的特异序列。 (5)初步判断HS103-700为水貂的微卫星序列。

目录

文摘

英文文摘

声明

1引言

1.1水貂的生物学特性

1.2水貂自咬症的概况

1.3水貂自咬症的发病原因

1.4水貂自咬症的国内外发生情况

1.5常用的DNA分子标记技术

1.6 RAPD技术在动物遗传育种中的应用

1.7 SCAR标记

1.8本研究的目的、意义及主要内容

2材料与方法

2.1试验材料

2.2实验方法

3结果与分析

3.1 DNA基因组的提取

3.2 PCR引物的筛选

3.3自咬水貂与健康水貂PCR电泳检测

3.4酶切图片

3.5测序结果

3.6 大连地区水貂的PCR验证

3.7对大兴安岭地区水貂验证

4讨论

4.1 PCR的影响因素

4.2引物的设计

4.3关于RAPD标记转化成SCAR标记的必要性

4.4 SCAR标记转换

4.5微卫星位点

5、结论

参考文献

附录

致谢

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