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【6h】

规律运动对增龄大鼠比目鱼肌细胞凋亡与自噬及其信号调控的影响

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目录

摘要

1 前言

2 材料与方法

2.1 实验对象及分组

2.2 运动训练方案

2.3 实验仪器与试剂

2.4 实验取材与样本制备

2.5 苏木精-伊红HE(Haematoxylin and easin)染色

2.6 TUNEL细胞凋亡检测程序(In situ cell death detection kit-POD法)

2.7 SOD、Beclin1、LC-Ⅲ、PGC-1 α和CaMK Ⅱα的免疫印迹测定

2.8 统计学分析

3 实验结果

3.1 增龄大鼠体重监控及变化的结果

3.2 增龄大鼠比目鱼肌HE染色与细胞凋亡的结果

3.3 增龄大鼠比目鱼肌SOD表达水平的结果

3.4 增龄大鼠比目鱼肌细胞自噬因子Beclin1和LC-Ⅲ的影响

3.5 增龄大鼠比目鱼肌PGC-1 α和CaMK Ⅱα信号转导的结果

4 讨论

5 结论

参考文献

文献综述 运动与细胞自噬

缩略词表

科研情况

致谢

声明

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摘要

目的:研究骨骼肌纤维增龄性老化的细胞凋亡与细胞自噬的规律及其信号调控的运动抗逆作用机制,为老年性肌力衰退的防治等提供研究资料。
  方法:用不同年龄段的健康SPF级雄性(Sprague-Dawley,SD)大鼠,即6月龄(青年)、16月龄(中年)和25月龄(老年))作为实验对象,每个年龄段分为静息对照组和运动组,对运动组大鼠实施10周递增负荷规律的中等强度有氧运动干预。采用HE和TUNEL法检测凋亡和免疫印迹等检测自噬及相关通路的蛋白质。
  结果:1)通过体视学方法分析,规律有氧运动提高了增龄性大鼠比目鱼肌肌纤维的成束性和缜密性,也提高了SOD表达水平。2)不同年龄静息对照组大鼠比目鱼肌细胞凋亡的增加呈现一定的增龄性趋势,但规律的中等强度有氧运动组各年龄大鼠凋亡指数分别增加了7.55%、20.26%(P<0.05)和14.52%(P<0.05)。3)静息对照组大鼠自噬基因LC-Ⅲ呈现增龄性降低趋势,运动组各年龄大鼠的LC-Ⅲ均显著上升(P<0.01),而自身LC-Ⅲ却呈现增龄性上升趋势。4)与相对应的对照组相比较,规律有氧运动各年龄大鼠自噬因子Beclinl表达均显著上升(P<0.05),其中Y-EX组上升最显著(P<0.01),各年龄运动组自身Beclinl的表达水平却呈现增龄性降低趋势。5)与Y-SED组相比,M-SED组的PGC-1α和CaMKⅡα表达水平增加,但0-SED组比Y-SED和M-SED两组的PGC-Ⅰα和CaMKⅡα表达水平显著下降(P<0.01)。与静息对照组相比较,Y-EX和M-EX两组的PGC-1α表达水平均呈现上升趋势,而CaMKⅡα表达水平均呈现显著下降趋势,但与0-SED组相比,0-EX组PGC-1α和CaMKⅡα表达水平显著上升(P<0.01,P<0.05)。
  结论:1)规律有氧运动对增龄性大鼠比目鱼肌细胞自噬与细胞凋亡的发生趋势出现增龄性变化,这种增龄性老化的发生发展与其两者间的平衡稳定关系有直接影响;2)通过激发Beclin1、PGC-1α和CaMKⅡ信号通路,对细胞凋亡与细胞自噬的平衡稳定起到调控作用,也对比目鱼肌的生物学功能和改善骨骼肌老化的发生起到调节作用。

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