间接共培养人髌下脂肪垫干细胞与骨关节炎软骨细胞的实验研究

摘要

目的：将人髌下脂肪垫干细胞(IPFPSCs)及骨关节炎软骨细胞(OACs)进行间接共培养，促进OACs软骨表型的恢复及诱导IPFPSCs向软骨细胞分化。 方法：体外分离、培养人IPFPSCs及OACs，分为单独IPFPSCs组、单独OACs组及IPFPSCs和OACs间接共培养组，体外成软骨诱导21d后，通过HE染色、Alcian蓝染色、免疫荧光细胞染色检测细胞的形态学，1型胶原蛋白(Col1)、Col2、Col10、聚集蛋白聚糖(aggrecan)及SOX-9的表达情况（各组细胞成软骨诱导分化情况）。 结果：共培养组OACs聚集成微球，IPFPSCs呈椭圆形;单独组OACs聚集分布，排列松散，单独组IPFPSCs呈长梭形。HE染色显示共培养组OACs聚集成团，核染色深，IPFPSCs呈椭圆形，胞质丰富，呈旋涡状生长;单独组OACs聚集分布，核染色浅;单独组IPFPSCs呈长梭形，核染色浅。阿尔新蓝染色显示共培养组OACs及IPFPSCs蛋白多糖分泌多，单独OACs及IPFPSCs组分泌少。免疫荧光染色显示共培养组IPFPSCs及OACs中Col2、aggrecan及SOX-9表达较强，Col1与Col10表达较弱;而单独培养的IPFPSCs及OACs组则相反。 结论：IPFPSCs和OACs间接共培养可以促进OACs软骨细胞表型的恢复及诱导IPFPSCs向软骨细胞分化。

目录

摘要

中英文缩写词表

引言

技术路线图

1．实验材料

2．实验方法及步骤

结果

1．人OA软骨与IPFP标本及细胞提取实验图

2．细胞形态学观察

3．细胞鉴定

4．HE染色

5．阿尔新蓝染色

6．免疫荧光染色

讨论

结论

参考文献

综述

在读期间的学术论文

致谢

声明