新型青蒿素衍生物的合成及其抗肿瘤活性的体外筛选

摘要

青蒿素及其衍生物除具有抗疟作用之外还具有抗肿瘤﹑抗病毒以及免疫抑制等多方面生物活性。其抗肿瘤作用机制不同于传统化疗药物,主要是通过Fe2+离子催化青蒿素的过氧桥断裂产生自由基,进而损伤细胞内的生物大分子,诱导细胞凋亡或抑制血管生成。因肿瘤细胞内Fe2+离子的含量远高于正常细胞,青蒿素及其衍生物对肿瘤细胞具有选择性抑制作用,而对正常组织毒副作用很小,且具有抗瘤谱广、可逆转肿瘤多药耐药﹑与传统化疗药物不存在交叉耐药等特点。抗肿瘤活性的新型青蒿素衍生物的合成和筛选已成为当今抗肿瘤药物化学领域的研究热点。本文主要开展了以下两方面的工作:
　　1.用NaBH4还原青蒿素制得双氢青蒿素,并将它分别与取代肉桂酰氯和取代苯甲酰氯反应制得了系列双氢青蒿素酯类衍生物。用MTT法考察所合成的衍生物对肿瘤细胞Bel-7402、A549的抑制作用,并选择其中活性较好的双氢青蒿素3,4-二甲氧基肉桂酸酯和双氢青蒿素对甲基苯甲酸酯用于多种肿瘤细胞。结果表明,它们对不同组织来源的多种细胞均有抑制活性。以效果最好的双氢青蒿素3,4-二甲氧基肉桂酸酯为代表,初步探索其肿瘤抑制的分子机制。采用Western blot法对肿瘤细胞A549凋亡通路上的关键蛋白进行检测,结果显示双氢青蒿素3,4-二甲氧基肉桂酸酯对A549细胞内的pro-caspase3、PARP的切割呈明显的剂量依赖性,10μM时pro-caspase3、PARP已经产生明显切割。
　　2.根据药物拼合的原理,设计、合成了3种新型双氢青蒿素拼合药物。将双氢青蒿素与氮芥甲酰氯反应制得双氢青蒿素氮芥甲酸酯。双氢青蒿素齐墩果酸偶联物和双氢青蒿素染料木素偶联物均以琥珀酸酐为偶联剂制备。采用MTT法考察了3种拼合药物对肿瘤细胞Bel-7402、A549的抑制作用,并与双氢青蒿素进行对照,结果显示所合成的拼合药物对肿瘤细胞Bel-7402、A549的抑制作用明显优于对照组双氢青蒿素。

目录

摘要

Abstract

第一章 绪论

1.1 青蒿素简介

1.2 抗肿瘤活性青蒿素衍生物分类

1.2.1 醚类青蒿素衍生物

1.2.2 酯类衍生物

1.2.3 青蒿素二聚体及三聚体衍生物

1.3 青蒿素及其衍生物抗肿瘤特点

1.3.1 肿瘤组织选择性

1.3.2 抗多药耐药

1.4 青蒿素及其衍生物抗肿瘤机制

1.5 本文主要研究内容

第二章 双氢青蒿素酯类衍生物的合成及体外抗肿瘤活性筛选

2.1 前言

2.2 实验部分

2.2.1 仪器与试剂

2.2.2 双氢青蒿素的合成

2.2.3 双氢青蒿素肉桂酸酯（1）的合成

2.2.4 双氢青蒿素 3,4-二甲氧基肉桂酸酯（2）的合成

2.2.5 双氢青蒿素 2-溴-4-氟肉桂酸酯(3)的合成

2.2.6 双氢青蒿素对甲氧基苯甲酸酯(4)的合成

2.2.7 双氢青蒿素邻氯苯甲酸酯(5)的合成

2.2.8 双氢青蒿素对甲基苯甲酸酯（6）的合成

2.2.9 体外抗肿瘤活性初步筛选

2.3 结果与讨论

2.3.1 双氢青蒿素的合成

2.3.2 双氢青蒿素酯的合成

2.3.3 双氢青蒿素酯的体外抗肿瘤活性

2.3.4 Western blot 法研究结果

2.4 小结

第三章 双氢青蒿素类拼合药物的合成及体外抗肿瘤活性筛选

3.1 前言

3.2 实验部分

3.2.1 仪器与试剂

3.2.2 双氢青蒿素氮芥甲酸酯（7）的合成

3.2.3 双氢青蒿素-齐墩果酸交联物（8）的合成

3.2.4 双氢青蒿素-染料木素交联物（9）的合成

3.2.5 肿瘤细胞增殖抑制试验

3.3 结果与讨论

3.3.1 双氢青蒿素氮芥甲酸酯的合成

3.3.2 双氢青蒿素-齐墩果酸交联物的合成

3.3.3 双氢青蒿素-染料木素交联物的合成

3.3.4 肿瘤细胞体外生长抑制作用

3.4 小结

结论

参考文献

附录 A 攻读学位期间所发表的论文目录

附录 B 部分化合物谱图

致谢