人参缩心饮对大鼠腹主动脉狭窄致心肌肥大的影响及作用机制研究

摘要

目的:观察人参缩心饮治疗慢性心力衰竭的临床疗效。采用临床试验方法，观察人参缩心饮临床疗效。采用动物实验方法，探讨人参缩心饮饮合剂对大鼠心肌重构的干预作用，并探讨其作用机制。
　　方法:采用临床实验疗效观察方法，选取自2013/2-2014/5的63例患者，随机分为试验组与对照组，检测其安全指标和疗效指标。采用动物实验方法，选取120只Wistar大鼠随，机分为假手术组(Sham);心肌肥厚组(CH);人参缩心饮低剂量组(RSSXY-L);人参缩心饮中剂量组(RSSXY-M);人参缩心饮高剂量组(RSSXY-H);阳性药物组。建立大鼠实验性心室重构模型。测定血流动力学指标;测定左心室脏器系数;测定左室前壁及室间隔厚度;测定左心室肌蛋白含量;测定左心室肌胶原含量测定;测定心肌间质胶原容积分数测定;采用Bradfor法检测Caspase活性;采用放射免疫法测定AngⅡ、ALD、ET、ANP含量;采用蛋白免疫印迹法检测心肌组织Caspase-3、Caspase-9、PARP、Bcl-2、Bax、p-38MAPK、p-P38MAPK、JNK、p-JNK、AKT、p-AKT的蛋白表达。
　　结果:
　　1.与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠SBP，DBP，MAP，LVSP及±dp/dtmax水平降低，HR及LVEDP水平升高，差异有统计学意义(P＜0.01);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量及高剂量组大鼠SBP，DBP，MAP，LVSP及±dp/dtmax水平升高，而HR及LVEDP水平降低，差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.0)1），其作用与阳性药卡托普利(P＜0.05或P＜0.01)相当，人参缩心饮低剂量组大鼠SBP、DBP、MAP、LVSP及±dp/dtmax水平有升高趋势， HR及LVEDP水平有降低趋势，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　2.与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠左心室绝对重量增加、心室脏器系数增加，差异有统计学意义(P＜0.001)，体重有下降趋势，差异无统计学意义(P＞0.05);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量及高剂量组大鼠组心室脏器系数降低，差异有统计学意义(P＜0.01)，其作用与阳性药卡托普利(P＜0.01)相当，人参缩心饮低剂量组大鼠心室脏器系数有所降低，左心室绝对重量也有所下降，但差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　3.与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠左室前壁及室间隔厚度明显增加，差异有统计学意义(P＜0.01);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量及高剂量组大鼠左室前壁及室间隔厚度减少，差异有统计学意义(P＜0.05)，其作用与阳性药卡托普利（P＜0.05或P＜0.01)相当，人参缩心饮低剂量组大鼠左室前壁及室间隔厚度有降低趋势，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　4.与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠左心室胶原含量明显增加，差异有统计学意义(P＜0.01)，左心室肌蛋白含量有增加趋势，差异无统计学意义(P＞0.05);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量及高剂量组大鼠左心室胶原含量减少，差异有统计学意义(P＜0.05)，左心室肌蛋白含量有减少趋势，差异无统计学意义(P＞0.05)，其作用与阳性药卡托普利(P＜0.05)相当，人参缩心饮低剂量组大鼠左心室胶原含量有降低趋势，左心室肌蛋白含量有减少趋势，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　5.与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠心肌间质胶原容积分数明显增加，差异有统计学意义(P＜0.01);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量及高剂量组大鼠心肌间质胶原容积分数减少，差异有统计学意义(P＜0.05)，其作用与阳性药卡托普利(P＜0.05)相当，人参缩心饮低剂量组大鼠心肌间质胶原容积分数有降低趋势，差异无统计学意义(P＞0.05)。
　　6.与假手术组大鼠相比，心肌肥厚组大鼠血清MDA含量增加、SOD、GSH-Px活性降低，差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.001);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠血清MDA含量减少、SOD、GSH-Px活性升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。与假手术组大鼠相比，心肌肥厚组大鼠血浆及心肌组织AngⅡ、ALD含量增加，差异有统计学意义(P＜0.01);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠血浆及心肌组织AngⅡ、ALD含量降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。与假手术组大鼠相比，心肌肥厚组大鼠血浆内皮素(ET)、心钠肽(AMP)含量升高，差异有统计学意义(P＜0.01);与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠血浆内皮ET、ANP及心肌组织Ca2+含量降低，差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　7.与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠心肌Caspase-3和Caspase-9活性明显升高(P＜0.01)。与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠心肌Caspase-3和Caspase-9活性显著降低(P＜0.05)。与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠心肌Caspase-3及Caspase-9蛋白表达明显增强，而Caspase-3底物PARP的降解增多;与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠心肌Caspase-3及Caspase-9蛋白表达明显减少，而Caspase-3底物PARP的降解减少，两剂量组无明显的量效关系。与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠心肌Bax蛋白表达增强，Bcl-2蛋白表达减弱，即Bcl-2/Bax比值降低。与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠心肌Bax蛋白表达减少，Bcl-2蛋白表达增加，两剂量组无明显的量效关系。与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠心肌P38MAPK及JNK磷酸化水平增加;与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠心肌P38MAPK及JNK磷酸化水平降低。与假手术组大鼠比较，心肌肥厚组大鼠心肌AKT磷酸化水平降低;与心肌肥厚组大鼠比较，人参缩心饮中剂量组及高剂量组大鼠心肌AKT磷酸化水平增加。
　　结论:人参缩心饮能够显著改善心衰患者安全指标及疗效指标。人参缩心饮能改善心肌肥厚大鼠血流动力学参数;明显降低心肌肥厚大鼠心脏系数;降低心肌肥厚大鼠左室前壁及室间隔厚度;降低心肌肥厚大鼠左心室胶原含量;降低心肌肥厚大鼠心肌间质胶原容积分数;增强心肌的抗氧化能力;抑制心肌肥厚大鼠肾素血管紧张素醛固酮系统活性;减少心肌肥厚大鼠缩血管物质水平;减少心肌肥厚大鼠心肌Caspase-3和Caspase-9活性;减少心肌肥厚大鼠心肌Caspase-3、Caspase-9及PARP蛋白表达;减少心肌肥厚大鼠心肌Bcl-2和Bax蛋白表达;抑制心肌肥厚大鼠心肌P38MAPK及JNK信号转导通路;抑制心肌肥厚大鼠心肌PI3K/AKT信号转导通路。

目录

声明

摘要

英文缩略语

前言

文献综述

综述一 慢性心力衰竭现代研究与治疗进展

1 正常状态下心肌能量代谢

2 衰竭时心脏能量代谢重构

3 神经内分泌系统

4 体液机制

5 炎性反应

6 氧化应激

7 心肌细胞凋亡

8 慢性心力衰竭的西医研究

综述二 慢性心力衰竭的中医进展

1 中医古籍对于慢性心力衰竭的研究

2 现代中医探讨慢性心力衰竭

实验一 人参缩心饮的临床疗效研究

1 研究目的及药物组成

1．1 研究目的

1．2 药物组成

2 病例选择标准

2．1 病例来源

2．2 诊断标准

2．3 病例选择

3 试验设计及方法

3．1 试验设计类型

3．2 药物、剂量与疗程

4 临床试验实施方法

4．2 给药方案

4．3 观测指标

4．4 疗效标准

5 临床资料的统计分析

6．1 一般资料

6．2 中医症候疗效比较

6．3 中医证候积分比较

6．4 超声心动图指标比较

6．5 治疗前后BNP值比较

6．6 安全性评价

实验二 人参缩心饮对腹主动脉狭窄致大鼠心肌肥厚的影响

3 实验方法

4 实验结果

5 小结

实验三 人参缩心饮对腹主动脉狭窄致大鼠心肌肥厚保护作用的机制

1 实验动物

2 药品、试剂及仪器

3 实验分组

5 大鼠血液生化指标的测定

6 Caspase活性检测

7 蛋白免疫印迹法检测心肌组织相关蛋白表达

8 数据统计方法

9 实验结果

9．2 人参缩心饮对心肌肥厚大鼠血浆Ang Ⅱ、ALD含量的影响

9．3 人参缩心饮对血浆ET、ANP的影响

9．4 人参缩心饮对心肌肥厚大鼠心肌Caspase-3和Caspase-9活性的影响

9．5 人参缩心饮对心肌肥厚大鼠心肌Caspase-3、Caspase-9及PARP蛋白表达的影响

9．6 人参缩心饮对心肌肥厚大鼠心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

9．8 人参缩心饮对心肌肥厚大鼠心肌PI3K／AKT信号途径的影响

10 小结

讨论

结语

致谢

参考文献