银杏外种皮生物活性物质提取研究

摘要

银杏外种皮含有银杏酸、黄酮、萜内酯和多糖，学界曾对其分离、鉴定及药理活性展开研究。本文在上述工作的基础上，探索银杏外种皮主要活性成分的综合提取，并对银杏外种皮黄酮、银杏酚酸及多糖提取物进行纯化。主要研究内容及结果如下：
　　（1）对银杏外种皮中黄酮、酚酸及多糖进行了联合提取研究，并对各活性物质的提取条件进行了探讨。结果表明：以石油醚为提取剂，可得到以银杏酸为主要成分的提取物，2次提取累计得率为98.5％，纯度54.6%；再以乙醇-水为溶剂对黄酮进行提取，1次提取率为96.4%，纯度7.5%；最后以水为溶剂从剩余固体中提取多糖，90℃浸提120 min，2次提取率为72.7%，纯度为24.3%。各活性成分提取的重复性较好，相对标准偏差（RSD）均小于0.40%。
　　（2）黄酮粗提物采用沉淀分离和大孔树脂吸附的方法进行进一步的分离纯化，得到了双黄酮、极性较大的黄酮苷和中等极性的黄酮醇苷三类物质。首先将粗提液蒸发浓缩除溶剂后，在pH为4.5~6.0条件下，沉淀分离出极性较小的物质，经HPLC和紫外光谱鉴定表明，主要为双黄酮类物质和银杏酸。进一步经石油醚萃取除酸，可得到纯度为76%的双黄酮类物质，其占总黄酮的33%；经HPLC和紫外光谱分析，浓缩沉淀后的母液中主要含黄酮苷类物质。经大孔树脂分离纯化，用水和20%乙醇水溶液洗脱得到极性较强的黄酮苷类产物，用70%乙醇水溶液洗脱得到极性中等的黄酮醇苷类产物。初步研究表明，中等极性黄酮苷产物与银杏叶黄酮提取物组分相同，含量约占黄酮总量的41%。其它主要为不可水解的黄酮苷。
　　（3）以石油醚-异丙醇-乙酸为混合洗脱剂，采用硅胶柱对银杏酸粗提物进行了分离和纯化。得到银杏酸纯度为97.5%，并对其组成与结构进行了 HPLC、紫外光谱和红外光谱鉴定。
　　（4）多糖粗提物经鉴定主要为非淀粉多糖。经醇沉和 sevage法(正丁醇:氯仿=1:4混合溶剂萃取)分离除去蛋白质，所得多糖产物含量达64%。

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第1章 绪论

1.1银杏资源、药用和经济价值及开发利用

1.2银杏外种皮主要化学成分及研究进展和应用前景

1.3银杏外种皮主要活性成分的提取

1.4研究目的意义和内容

第2章 银杏外种皮活性成分联合提取研究

2.1银杏外种皮各活性成分的联合提取

2.2试验方法

2.3结果与讨论

2.4本章小结

第3章 银杏外种皮黄酮提取物的分离纯化

3.1银杏黄酮的纯化

3.2试验方法

3.3结果与讨论

3.4本章小结

第4章 银杏酸及银杏多糖的分离纯化和分析

4.1银杏酚酸及多糖的纯化

4.2试验方法

4.3结果与讨论

4.4 本章小结

第5章 结论

致谢

参考文献

攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果