西维来司钠对大鼠重症急性胰腺炎的治疗作用及机制研究

摘要

急性胰腺炎的发病率呈逐年上升趋势，多器官功能不全综合征是治疗重症急性胰腺炎最棘手的问题之一。西维来司钠是一种中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂，近年的研究表明其对多种炎症反应所导致的器官功能损害具有治疗作用。本研究的目的是观察西维来司钠对大鼠重症急性胰腺炎是否有治疗作用并探讨其可能的机制。以4％牛黄胆酸钠胆胰管逆行注射制造重症急性胰腺炎模型，治疗组造模后立即给予西维来司钠(0.2mg/kg/hr)尾静脉注射，动态观察胰腺、肺、肾及肝脏的病理改变，检测血清中的中性粒细胞弹性蛋白酶、TNF-α、IL-6以及反映脏器功能的相关指标;并进一步检测肝组织中NE、MDA以及SOD的含量，肝细胞凋亡情况以及造模后12h Bcl-2/Bax基因表达情况。结果发现西维来司钠治疗可降低血清中性粒细胞弹性蛋白酶、TNF-α以及IL-6的含量，减轻胰腺、肺、肾、肝组织病理损伤以及血清酶学指标;降低肝组织中NE及MDA含量并提高SOD水平，提升Bcl-2/Bax基因表达比例并减少肝细胞凋亡。因此我们认为西维来司钠对重症急性胰腺炎的多器官功能损害具有保护作用;其可以降低肝组织NE及MDA含量，提升SOD以及Bcl-2/Bax基因表达水平从而减少肝细胞凋亡。 第一部分 西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠多器官损害的保护作用及机制 目的：观察西维来司钠(Sivelestat)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)大鼠多器官损害的保护作用并探讨其机制。方法：健康雄性SD大鼠84只，随机分为C组（对照组）、P组（SAP组）、S组(SAP+Sivelestat治疗组)，每组28只。C组为假手术组，P组大鼠以4％牛黄胆酸钠胆胰管逆行注射制造重症急性胰腺炎模型，S组造模后立即给予Sivelestat(0.2mg/kg/hr)尾静脉注射治疗。3组大鼠每组取10只观察24小时生存率;并分别于术后3、6、12h分别取6只大鼠检测血清TNF-α、IL-6、NE、Amy、ALT、AST、BUN、Cr含量，动脉血气分析以及肺干/湿重比;取12h时点大鼠胰腺、肺、肾以及肝脏组织行常规HE染色切片观察组织病理改变并进行评分。结果：各时点P组大鼠血清TNF-α、IL-6、NE、Amy、ALT、AST、BUN、Cr含量、PaO2以及肺干/湿重比均较对照组显著升高(P＜0.01);与P组比较，S组大鼠的上述指标均有明显改善（P＜0.01）;组织病理切片观察以及评分结果显示P组大鼠的胰、肺、肾及肝脏病变均随病情进展逐渐加重，而S组则较P组有明显缓解。结论：西维来司钠可减轻SAP大鼠多器官功能损害程度，其机制可能与抑制中性粒细胞弹性蛋白酶及减少TNF-α、IL-6的释放有关。 第二部分 西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响 目的：观察西维来司钠(Sivelestat)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2/Bax基因表达的影响，并探讨其机制。方法：健康雄性SD大鼠54只，随机分为C组（对照组）、P组（SAP组）、S组(SAP+Sivelestat治疗组)，每组18只。C组为假手术组，P组大鼠以4％牛黄胆酸钠胆胰管逆行注射制造重症急性胰腺炎模型，S组造模后立即给予Sivelestat（0.2mg/kg/hr）尾静脉注射治疗。3组大鼠术后3、6、12h分别取6只大鼠检测肝组织NE、MDA及SOD含量;原位末端标记法检测造模后大鼠肝细胞凋亡并计算凋亡指数;流式细胞学方法测定肝细胞凋亡率;Western blot法检测造模后12hBcl-2/Bax基因表达情况。结果：与C组比较，各时点P组大鼠肝细胞凋亡指数及细胞凋亡率均明显升高;肝组织内NE、MDA含量升高，SOD含量下降;肝组织Bcl-2表达减少，Bax的表达增多。与P组比较，各时点S组大鼠肝细胞凋亡指数及细胞凋亡率均有明显降低;肝组织内NE及MDA含量降低而SOD含量升高;肝组织Bcl-2表达增多而Bax表达下降。结论：西维来司钠可抑制SAP大鼠肝细胞凋亡;具体机制可能与其拮抗NE及氧自由基，从而提高Bcl-2/BAX比值有关。

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声明

摘要

缩略词表

引言

第一部分西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠多器官损害的保护作用及机制

前言

材料和方法

第二部分西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠肝细胞凋亡及Bcl-2／Bax表达的影响

前言

材料和方法

结语

参考文献

综述一 细胞凋亡在急性胰腺炎发生发展中的作用

综述二 西维来司钠的多器官保护作用机制研究进展

在读期间发表的论文

致谢