益气解毒颗粒影响鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡活性的实验研究

摘要

目的：观察益气解毒方原方及拆方药物血清对人鼻咽癌细胞增殖活性和凋亡活性的影响，从细胞凋亡诱导和增殖抑制效应角度探讨其抗肿瘤作用的机制。 结论：(1)各组分药物血清对鼻咽癌细胞增殖活性均有较显著的抑制作用，尤以原方效应最为明显，且随着药物血清剂量的加大或培养时间的延长，其抑制作用进一步增强，与对照组相比，具有显著差异性。(2)益气解毒方原方组、益气组分组的15％药物血清均能诱导鼻咽癌细胞凋亡，而解毒组分组、养阴组分组、其它组分的15％药物血清诱导细胞凋亡效应较低。其中，原方组的细胞凋亡诱导作用最明显。但随着作用时间的相对延长，各组分组的凋亡指数均显示不同程度的升高趋势。15％正常大鼠血清对细胞生长无抑制作用。(3)原方及其拆方组的15％药物血清均能抑制鼻咽癌细胞的PCNA表达，增强P53的表达，但益气解毒方原方组和益气组分组所致的P53蛋白阳性表达率分别高于解毒组分组、养阴组分组、其它组分组。(4)益气解毒方可能通过调控细胞基因表达模式而抑制鼻咽癌细胞的增殖，诱导细胞凋亡。这可能是该方抗鼻咽癌的主要作用机理之一。其中，原方诱导鼻咽癌细胞凋亡效应，与其益气组分的功效有密切关系。

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及关于学位论文使用授权说明

引言

第一部分材料与方法

1实验材料

1.1动物

1.2细胞株

1.3主要试剂

1.4主要仪器设备

2实验方法

2.1药液的制备

2.2药物血清的制备

2.3细胞培养液的制备

2.4细胞培养

2.5 MTT比色法检测细胞增殖活性抑制实验

2.6细胞周期效应和凋亡诱导活性的流式细胞仪检测

2.7 PCNA和P53表达活性的细胞免疫化学检测

3统计方法

第二部分结果与分析

1 MTT比色法检测细胞增殖活性抑制实验

1.1不同浓度、不同时相药物血清对细胞增殖活性的影响

1.2 15％正常大鼠血清和15％药物血清对细胞增殖活性的影响

2各组15％药物血清对HNE1细胞周期效应和凋亡诱导活性的影响

3各组15％药物血清对HNE1细胞PCNA、P53表达的影响

第三部分讨论

1中医学对鼻咽癌的认识

2鼻咽癌癌变分子机制

3益气解毒方组方原则

3.1本方所用中药的药效学依据

3.2组方原则及主要药效

4血清药理学

5益气解毒方对鼻咽癌细胞增殖活性和细胞凋亡活性的影响

6益气解毒方对鼻咽癌细胞PCNA和P53和活性的影响

结 论

参考文献

致谢

附录一：流式细胞仪检测图谱

附录二：细胞免疫组化图

文献综述:中医药促进细胞调亡机理研究进展