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论文创新点
第一章文献综述
1.1高等植物细胞壁的研究进展
1.1.1高等植物细胞壁成分和结构模型
1.1.2细胞壁结构模型
1.1.3细胞壁的功能
1.2高等植物细胞壁中的结构蛋白质
1.2.1伸展蛋白
1.2.2寓含甘氨酸蛋白
1.2.3富含脯氨酸蛋白
1.2.4阿拉伯半乳聚糖蛋白
1.3立题依据和研究意义
第二章棉花纤维特异表达PRP基因的分离、鉴定和表达分析
2.1前言
2.2实验材料
2.2.1植物材料
2.2.2菌种和质粒
2.2.3化学试剂和溶液
2.3实验方法
2.3.1点杂交
2.3.2细胞壁结构蛋白的cDNA芯片杂交
2.3.3基因序列分析
2.3.4实时定量RT-PCR分析
2.3.5 Northern杂交
2.3.6 GhPRP3过量表达载体和RNAi载体的植物遗传转化
2.4结果与分析
2.4.1芯片杂交分离细胞壁结构蛋白基因
2.4.2 GhGRPs序列分析、基因鉴定和表达分析
2.4.3GhPRPs序列分析、基因鉴定和表达分析
2.4.4 GhPRP3过量表达和RNAi载体的植物遗传转化
2.4 讨论
2.4.1采用芯片杂交法分离筛选基因
2.4.2用不同基因表达方法验证芯片杂交法分离基因的可靠性
2.4.3棉花GhGRP基因的结构特点和初步表达分析
2.4.4棉花中几个PRP基因的分离鉴定和表达分析
2.4.5 GhPRP3过量表达载体烟草遗传转化
第三章棉花FLA基因的分离、鉴定和表达分析
3.1前言
3.2实验材料
3.3实验方法
3.3.1激素和NaCl处理离体棉花10 DPA胚珠和纤维
3.3.2 GhFLA基因的分离
3.3.3 GhFLA的鉴定
3.3.4实时定量RT-PCR分析
3.3.5 GhFLA1过量表达载体和RNAi载体的植物遗传转化
3.4结果与分析
3.4.1棉花FLA基因的分离
3.4.2棉花FLAs的结构分析
3.4.3 GhFLA基因在棉花不同组织中的分化表达
3.4.4 GhFLA基因在棉花纤维中的表达是发育调控的
3.4.5 GhFLA基因的在纤维中的表达也受植物激素和NaCl的调节
3.4.6 GhFLA1过量表达载体和RNAi载体的烟草的遗传转化
3.4.7 GhFLA1过量表达载体和RNAi载体的棉花遗传转化
3.5讨论
第四章棉花细胞壁结构蛋白基因启动子的克隆和表达活性分析
4.1前言
4.2材料
4.2.1植物材料
4.2.2菌株和载体
4.2.3主要试剂
4.2.4培养基
4.3方法
4.3.1引物设计
4.3.2 Genome walker PCR方法调取启动子
4.3.3启动子表达载体的构建和植物遗传转化
4.4结果与分析
4.4.1 GhPRP3、GhPRP5、GhFLA1和GhFLA4启动子的获得
4.4.2 pGhPRP3、pGhPRP5、pGhFLA1和pGhFLA4序列分析
4.4.3四个启动子序列与GUS融合载体构建
4.4.4启动子载体转化烟草植株及组织化学染色
4.4.5启动子载体转化拟南芥及组织化学染色
4.5 讨论
4.5.1启动子分离
4.5.2启动子的生物信息学分析
4.5.3启动子的特异性表达
第五章GhFLA1和GhFLA4蛋白的亚细胞定位
5.1前言
5.2材料
5.2.1植物材料
5.2.2菌株和载体
5.2.3主要试剂
5.2.4主要培养基配方
5.3方法
5.3.1载体构建
5.3.2农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化
5.3.3愈伤组织细胞的荧光观察和照相
5.3.4拟南芥的培养、遗传转化
5.3.5拟南芥根细胞的荧光观察和照相
5.4结果与分析
5.4.1载体构建及检测
5.4.2 GhFLA1和GhFLA4在棉花细胞中的定位
5.4.3 GhFLA4在拟南芥根中的定位
5.5讨论
参考文献
附录
博士期间已发表的论文
致谢