峨眉树蛙微卫星位点的分离和多态性分析

摘要

在许多动物中，雌性和雄性对配偶的选择是普遍存在的，这种选择受很多因素的影响，有来自内部的因素，如身体的大小、颜色、气味、装饰、精子的质量等，也有来自外部因素，如领域、资源、等级地位、温度、海拔等。近几十年来，国内外很多研究人员利用生态学和分子生物学方法对此进行了研究，其研究对象涉及到鱼类、鸟类、爬行类以及哺乳类动物，而对两栖类动物的配偶选择却研究的很少。动物对配偶数所占有的不同会导致不同的婚配制度，主要有单配制和多配制，多配制又可分为一雄多雌制、一雌多雄制以及混交制。婚配制度可以产生重要的生态和进化影响，例如，婚配制度可以影响种群内以及种群间遗传变异的分布，可以维持种群的遗传多样性，领域权的演变，以及性选择强度等。配偶选择在婚配制度和性选择的研究中占据着举足轻重的作用，然而，到目前为止，对于配偶选择进化机制的许多重要问题仍然没有得到很好的解决。
　　 在野外的研究中发现，峨眉树蛙(Rhacophorus omeimontis)是一种在地理上分布很广泛的物种，而且在一次繁殖期间它会表现出一雌多雄的婚配制度，即一只雌性个体和多只雄性个体进行交配。这种繁殖模式暗示我们峨眉树蛙是一种极好的研究配偶选择进化机制的模式生物。因此，本研究选用峨眉树蛙为实验材料，运用磁珠富集法和FIASCO快速分离微卫星这两种方法筛选出了峨眉树蛙的11个多态性微卫星位点用于对其配偶选择的研究。结果表明：在这11个多态性微卫星位点中，每个位点在24个个体中等位基因的数目是从4到15，每个位点的平均观测杂合度(HO)介于0.250与0.839之间，期望杂合度(HE)介于0.562与0.914之间。在这11个微卫星位点中，有2个位点明显偏离哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinbergequilibrium)，两个位点对之间存在显著的连锁不平衡。所有的位点都表现出低的无效等位基因频率。在这11个位点中，既没有出现由于碱基滑动造成的等位基因判别错误，也没有发现大的等位基因的丢失。但是，由于在两个位点等位基因出现的纯合机率比较高，导致了在这两个位点无效等位基因的出现。此外，在所筛选出的11个微卫星位点中，有8个位点的PIC＞0.5，占到总位点数的72.7％，这表明8个位点均具有较高的多态性，可以提供丰富的位点信息。因此，这些多态性微卫星位点将会成为进一步研究峨眉树蛙配偶选择的有用的分子标记。