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木糖醇亚硒酸酯诱导癌细胞凋亡的毛细管电泳分析

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摘要

鱼塘坝,位于湖北恩施自治州,是典型的高硒地区之一。利用硒资源和硒的生理功能,已开发出许多富硒产品。硒作为人体必需的微量元素,能防治癌症,且其抗癌作用受硒化合物的化学结构及药物剂量影响。亚硒酸钠是研究最早、最深入的抗癌硒化合物之一。本文所用木糖醇亚硒酸酯,为新型化学合成的有机含硒糖类。
   首先,研究木糖醇亚硒酸酯、亚硒酸钠对SMMC-7221肝癌细胞系增殖和凋亡的影响。研究表明,木糖醇亚硒酸酯、亚硒酸钠对SMMC-7221肝癌细胞系增殖均有明显抑制作用,且木糖醇亚硒酸酯抑制癌细胞增殖的能力强于亚硒酸钠。经琼脂糖凝胶电泳检测,木糖醇亚硒酸酯处理组能检测到梯形条带;而未加药的阴性对照组和亚硒酸钠阳性对照组均无明显DNA断裂现象。
   其次,采用动态涂层毛细管电泳法,对进样时间、分离电压、进样模式、检出限浓度、分离温度、电泳缓冲液的pH值、分离缓冲液中羟丙基甲基纤维素(HPMC)及甘露醇(mannitol)的浓度等条件进行了选择,确定了DNA分离的标准曲线。
   最后,采用动态涂层毛细管电泳技术,分析木糖醇亚硒酸酯诱导癌细胞凋亡的具体情况。木糖醇亚硒酸酯诱导癌细胞凋亡后,细胞基因组DNA碎片为140 bp或180 bp的整数倍体。亚硒酸钠诱导SMMC-7221肝癌细胞凋亡的作用不明显。
   本文分别采用MTT法、琼脂糖凝胶电泳检测法、毛细管电泳法,对木糖醇亚硒酸酯的抗癌效力进行分析。结果显示,木糖醇亚硒酸酯诱导SMMC-7221肝癌细胞系通过凋亡途径死亡,且抗癌效力更高。本文建立的毛细管电泳检测方法,将有利于阐明木糖醇亚硒酸酯及其他硒化合物的抗癌效力。

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