变铅青链霉菌LH001产孢条件优化及其发酵产物PLA2在米糠油脱胶中的应用

摘要

磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂酶家族中的一种重要酶类,它在油脂脱胶、磷酯改性等行业中的应用潜力巨大。商品化的磷脂酶A2主要来自动物胰脏和微生物发酵,国内关于磷脂酶A2的生产和应用起步较晚,目前还处于试验摸索阶段。
　　 变铅青链霉菌LH001(Streptomyces lividansLH001)是一株通过基因工程手段获得的PLA2高产菌株。由变铅青链霉菌LH001发酵生产的PLA2具有较高的温度耐受性和底物专一性,因此适合于工业应用。
　　 本试验主要进行2个方面的研究:1.变铅青链霉菌LH001产孢条件的优化；2.磷脂酶A2在米糠油油脂脱胶中的应用。研究结果如下:
　　 1.通过对变铅青链霉菌LH001产孢条件的优化,发现在pH8的含0.03％NaN03的麦麸琼脂培养基上,接种一定量的变铅青链霉菌LH001,放置于28℃光照培养箱中,进行全光照条件培养7d,其产孢量从原来的0.7×105个/mm2提高至3.24×105个/mm2,产孢能力有了大幅度的提高。
　　 2.利用自制PLA2进行米糠油脱胶实验,通过单因素试验和正交试验,进行脱胶条件的优化。用0.066％柠檬酸处理30min,然后在4000r/min条件下依次加入0.07％NaOH,3％蒸馏水,0.015％PLA2,45℃静置反应2h,处理后油品中磷含量为9.15mg/kg,低于10mg/kg,而对照组的磷含量为27.35mg/kg,远远高于酶处理后的磷含量。结合280℃加热试验,经酶处理后的油在加热过程中没有出现结焦变黑等不良现象,而对照组的油样加热后出现发黑并且产生沉淀,说明米糠油经该酶法处理后油中磷含量降至很低。