间型假丝酵母C410防治番茄灰霉病的研究

摘要

番茄灰霉病是导致番茄减产、品质下降的重要性病害。利用酵母菌作为生防因子展开番茄灰霉病的防治工作是一种优势手段。初期研究证明间型假丝酵母（Candidaintermedia）C410菌株对贮藏期草莓果实灰霉病有明显的防治效果，但对其防治保护地番茄灰霉病的效果及在番茄上的存活动态等问题尚不明确。同时，为利用C410防治番茄灰霉病，还需要制备酵母菌剂。针对上述问题，我们开展了专门研究。得到的研究结果如下:
　　1.明确了酵母菌株C410对番茄灰霉病的生防潜力。用不同浓度的C410酵母细胞悬浮液和灰葡萄孢分生孢子液分别混合接种于离体YPDA培养基平板、番茄果实、番茄叶片上。研究表明浓度为3×108，3×107，3×106cells/mL时，C410能显著抑制灰霉分生孢子萌发和菌丝生长，减轻果实和叶片感染灰霉病。推测营养竞争是C410菌株防治番茄灰霉病发生的重要机制。
　　2.利用选择性分离法明确了菌株C410在番茄花瓣上的存活动态。结果显示，C410花瓣喷雾处理后能适应保护地起伏波动的温湿度环境，在花瓣上可以存活5d左右或至其凋落;试验后期分别对清水及C410花瓣处理的成熟番茄单果进行称重，结果显示C410花瓣处理提高了番茄单果重，提高率达24.8％。
　　3.在湖北省多地评估了C410防治保护地番茄灰霉病的效果。2013和2014年在湖北省武汉市、武穴市、麻城市、咸宁市等保护地番茄种植基地分别开展小区试验。调查发现在武穴和咸宁等地灰霉病发生较严重，C410细胞悬浮液花期喷雾降低了田间番茄灰霉病发病严重度;而在武汉和麻城等地，灰霉病轻微发生，影响了C410防治番茄灰霉病的效果。
　　4.调查了C410对番茄植株株高和产量的影响。结果发现C410处理对番茄植株高度没有明显影响，能够一定程度地提高番茄果实单株产量。
　　5.以C410酵母细胞为有效菌剂成分，筛选适合酵母细胞存活的水悬浮剂配方，并对水悬浮剂保存的酵母起始浓度，储存温度以及水悬浮剂的生防稳定性进行进一步探索。结果显示，当保存起始细胞浓度为2×109CFU/mL，保存温度为4℃恒温保存，在磷酸缓冲液PPB中添加5％海藻糖和1mM抗坏血酸VC，能够使C410酵母细胞保持高效活力持续90d以上。对保存90d的水悬浮剂防效进行测定发现其防治效果与新鲜酵母细胞悬浮液的防效相当，都能抑制番茄灰霉病菌的生长繁殖，保持番茄果实品质完整。
　　上述研究结果为利用C410防治番茄灰霉病奠定了基础。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1 番茄灰霉病

1．1 病原物及发病情况

1．2 防治方法

2 生防酵母菌的研究进展

2．1 酵母菌的生防机理

2．2 生防酵母菌剂的制备

3 本课题的研究意义和研究内容

3．1 研究意义

3．2 研究内容

第二章 酵母菌株C410对番茄灰霉病的室内防效评估

1 材料

1．1 试验菌株培养

1．2 培养基

1．3 其它材料

2 试验方法

2．1 C410细胞悬浮液对灰葡萄孢分生孢子的抑制作用(in vitro)

2．2 C410细胞悬浮液对番茄果实上灰霉病的抑制作用

2．3 C410细胞悬浮液对番茄叶片灰霉病的抑制作用

2．4 数据统计分析

3 结果与分析

3．1 C410细胞悬浮液对灰葡萄孢分生孢子的抑制作用(in vitro)结果

3．2 C410细胞悬浮液对番茄果实上灰霉病的抑制作用结果

3．3 C410细胞悬浮液对番茄叶片灰霉病的抑制作用结果

4 讨论

第三章 酵母菌株C410在番茄盛花期花瓣上的存活动态监测

1 材料

1．1 试验菌株培养

1．2 培养基和药剂

2 试验方法

2．1 检测酵母菌选择性培养基的确定

2．2 C410在番茄盛花期花瓣上的存活检测

2．3 C410细胞悬浮液番茄花瓣处理对番茄单果重的影响

3 结果与分析

3．1 检测酵母菌选择性培养基的确定

3．2 C410在番茄盛花期花瓣上的存活检测

3．3 C410细胞悬浮液番茄花瓣处理对番茄单果重的影响

4 讨论

第四章 C410细胞悬浮液防治保护地番茄灰霉病试验

1 材料

1．1 试验菌株培养

1．2 C410细胞悬浮液的获得

1．3 培养基

2 试验方法

2．1 C410细胞悬浮液防治保护地番茄灰霉病小区试验

2．2 C410细胞悬浮液防治保护地番茄灰霉病大区试验

2．3 C410细胞悬浮液花期喷雾处理对保护地番茄株高的影响

2．4 C410细胞悬浮液喷雾处理对保护地番茄产量的影响

2．5 数据统计分析

3 结果与分析

3．1 武穴试验

3．2 武汉试验

3．3 咸宁试验

3．4 麻城试验

3．5 C410细胞悬浮液花期喷雾处理对保护地番茄株高的影响

3．6 C410细胞悬浮液喷雾处理对保护地番茄产量的影响

4 讨论

第五章 酵母菌C410水悬浮剂的制备

1 材料

1．1 试验菌株培养

1．2 C410细胞悬浮液的获得

1．3 培养基和试剂

2 试验方法

2．1 C410水悬浮剂有效成分酵母菌体的获取

2．2 C410水悬浮剂酵母菌体保存浓度的确定

2．3 C410水悬浮剂保存温度的确定

2．4 优势水悬浮剂储存90天后的防效检测

2．5 数据统计分析

3 结果与分析

3．1 C410水悬浮剂保存浓度的确定

3．2 C410水悬浮剂保存温度的确定

3．3 C410水悬浮剂储存90天后的防效

4 讨论

全文总结与展望

参考文献

致谢