间型假丝酵母C410产生挥发性抗真菌物质的条件优化及其对草莓储藏期病害的防治研究

摘要

论文研究了间型假丝酵母C410产生挥发性气体(Volatile organic compounds，VOCs)的培养条件优化；评估了VOCs对草莓储藏期病害防病潜力；探讨了C410在保护地防治番茄灰霉病的效果；最后对C410熏蒸剂进行了研究。取得的研究结果如下：　　 1.通过生物测定法测定了培养基、碳源、氮源、pH值和温度等因子对间型假丝酵母C410产生VOCs的影响。结果表明：用MCDA培养基培养酵母菌，生物量达到最高，产生的VOCs对灰霉菌菌落生长抑制效果显著。最适宜菌株C410产生VOCs的碳源为麦芽糖和葡萄糖；最适宜无机氮源为硫酸铵；最适宜有机氮源为精氨酸；最适宜pH值范围为5～7；最适宜生长温度为25℃。　　 2.通过分离、筛选得到177株草莓储藏期病害病原菌，经传统的形态特征和分子生物学的ITS测序比对结果，将菌株分别鉴定为10个种；通过平板对峙试验和离体果实接种试验，证实了间型假丝酵母C410产生的VOCs对草莓储藏期病害进行防治均具有显著地防治效果。　　 3.通过2011年和2012年两年的田间防治试验，证实间型假丝酵母C410细胞悬浮液对温室番茄灰霉病的发生具有显著地防治效果。　　 4.对酵母菌进行制剂研发，筛选出面粉和稻壳为最佳发酵基质；并初探了干酵母的制备流程，筛选最适宜离心条件为5000 r/min、20 min及洗涤液浓度为1%。确定干燥温度、时间为25℃，30 min。对乳化剂的选择和添加量进行优化，得出吐温80：司盘60(1:1)为最佳保护干酵母细胞在干燥和复水过程活性损失；并证实，筛选出的发酵基质与酵母菌孢子液混合制剂，在草莓储藏过程中，其产生的挥发性物质对草莓果实自然发病情况有显著地抑制作用。

目录

文摘

英文文摘

第一章 文献综述

1 草莓储藏期病害研究进展

1.1 草莓储藏期病害的危害

1.2 草莓储藏期病害的防治

2 温室番茄灰霉病的发生与防治

2.1 温室番茄灰霉病的发生及危害

2.2 温室番茄灰霉病的防治措施

3 拮抗酵母菌的研究进展

3.1 拮抗酵母菌的研究

3.2 拮抗酵母菌产生挥发性物质的研究

4 酵母菌生物制剂研究

5 本研究的意义和主要研究内容

5.1 本研究的意义

5.2 课题的研究内容

第二章 问型假丝酵母C410产生挥发性物质的培养条件优化

1 材料

1.1 供试菌株培养

1.2 培养基

1.3 试验仪器

2 方法

2.1 Candida intermedia C410产生挥发性物质的培养条件优化

2.2 GC-MS分析法分析Candida intermedia C410挥发性物质成分

2.3 数据分析与统计

3 结果与分析

3.1 Candida intermedia C410产生挥发性物质的培养条件优化

3.2 不同营养条件对Candida intermedia C410产生挥发性物质成分分析

4 讨论

第三章 酵母菌C410产生的挥发性物质对草莓储藏期病害的防治效果

1 材料

1.1 草莓果实

1.2 供试培养基

1.3 基因组DNA提取相关试剂及配制

1.4 PCR扩增试剂

1.5 供试材料

2 方法

2.1 草莓储藏期病害病原菌的分离

2.2 草莓储藏期病害病原菌的初筛

2.3 草莓储藏期病害病原菌致病力测定

2.4 草莓储藏期病害病原菌的形态学观察

2.5 草莓储藏期病害病原菌的分子鉴定ITS-5.8S rDNA序列分析

2.6 Candida intermedia C410产生挥发性物质对病原菌的抑制作用

2.7 Candida intermedia C410产生挥发性物质对草莓储藏期病害的防治

2.8 数据分析与统计

3 结果与分析

3.1 分离结果

3.2 初筛结果

3.3 致病力测定结果

3.4 草莓储藏期病害病原菌的分子鉴定结果

3.5 Candida intermedia C410产生挥发性物质对病原菌的抑制作用

3.6 Candida intermedia C410产生挥发性物质对草莓储藏期病害的防治

4 讨论

第四章 酵母菌C410的温室番茄灰霉病的防治效果

1 材料、培养基

1.1 供试菌株

1.2 供试培养基

1.3 供试材料

2 试验方法

2.1 2011年田间试验

2.2 2012年田间试验

2.3 数据分析与统计

3 试验结果

3.1 田间试验(2011年)

3.2 田间试验(2012年)

4 讨论

第五章 酵母菌制剂研发

1 材料、培养基

1.1 供试菌株

1.2 供试培养基

1.3 供试材料

1.4 实验仪器

2 方法

2.1 填充料的筛选

2.2 干酵母的制备

3 结果与分析

3.1 填充料的筛选

3.2 干酵母的制备流程

3.3 酵母制剂产生的挥发性气体对草莓储藏期自然发病果实的防治效果

4 讨论

参考文献

致谢