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达氏鲟GTH基因克隆、表达及重组FSH对其精巢发育的影响研究

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缩略语表

第1章 文献综述

1.1 鱼类GTH的研究进展

1.1.2 GTH的类型

1.1.3 GTH的生理功能

1.2 鱼类GTH的分泌调控

1.2.1 GnRH的调控

1.2.2 性类固醇激素的调控

1.3 重组FSH的研究进展

1.4 达氏鲟研究进展

1.4.1生物学特征及生活习性

1.4.2达氏鲟的资源分布

1.5 本研究的目的和意义

达氏鲟GTH基因克隆、表达分析及rAdFSH获得

2.1 材料与方法

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要仪器设备

2.1.3 试剂盒、主要试剂

2.1.4 载体、菌株和培养基

2.1.5 RNA提取、单链cDNA及SMART cDNA合成

2.1.6 达氏鲟GTHα1、GTHα2、FSHβ、LHβ基因全长获取

2.1.7 达氏鲟GTHα1、GTHα2、FSHβ、LHβ基因序列分析

2.1.8 达氏鲟GTHα、FSHβ、LHβ基因的时空表达特征

2.1.9 达氏鲟FSH原核表达载体的构建及rAdFSH的表达

2.2结果

2.2.1 达氏鲟GTHα1、GTHα2、FSHβ、LHβ序列分析及蛋白质结构预测

2.2.2 达氏鲟GTH氨基酸同源性分析及系统进化树的构建

2.2.3 达氏鲟GTHα、FSHβ、LHβ mRNA的组织表达特征

2.2.4 达氏鲟FSH表达系统构建及rAdFSH获得

2.3 讨论

第3章 rAdFSH对达氏鲟性腺发育的影响

3.1 试验设计

3.1.1 试验鱼及试验饲料

3.1.2 试验设计

3.1.3 试验管理

3.1.4 采样与测定方法

3.2 试验方法

3.2.1总RNA提取

3.2.2 qRT-PCR反应cDNA模板的制备

3.2.3 引物设计与合成

3.2.4 实时荧光定量PCR

3.2.5 性腺组织石蜡切片制作

3.2.6 数据分析

3.3 结果

3.3.1 性腺发育组织学观察

3.3.2 rAdFSH对达氏鲟垂体中GTHα、FSHβ、LHβ表达的影响

3.3.3 rAdFSH对达氏鲟性腺中FSHR、LHR表达的影响

3.4 讨论

3.4.1 rAdFSH添加对达氏鲟性腺发育的组织学观察

3.4.2 rAdFSH添加对达氏鲟性腺发育相关基因表达的影响

结论

参考文献

附录

致谢

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