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捻转血矛线虫Hc--tgfbr1,Hc--tgfbr2和Hc--tgh--2基因结构和功能的研究

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摘要

缩略语表

1.前言

1.1捻转血矛线虫概述

1.1.1捻转血矛线虫的流行及危害

1.1.2捻转血矛线虫的生活史

1.1.3捻转血矛线虫的形态特征

1.1.4捻转血矛线虫感染性三期(iL3)的发育特点

1.2秀丽新杆线虫中Dauer的形成机制及研究进展

1.2.1秀丽新杆线虫生活史

1.2.2调控秀丽新杆线虫Dauer形成的机制

1.2.3 Dauer假说的提出及其在寄生线虫中的应用

1.3 β转化生长因子样(TGF β)信号通路研究进展

1.3.1 TGF β超家族配体

1.3.2跨膜丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶受体

1.3.3 Smad信号传导蛋白

2.研究目的和意义

3.材料与方法

3.1实验材料

3.2.3主要溶液配制

3.3试验方法

3.3.1捻转血矛线虫和秀丽新杆线虫保种

3.3.2捻转血矛线虫和秀丽新杆线虫基因组DNA的提取

3.3.3捻转血矛线虫和秀丽新杆线虫RNA的提取和eDNA的合成

3.3.4 Hc-tgfbr1、Hc-tgfbr2和Hc-tgh-2全长gDNA序列的获得

3.3.5 Hc-tgfbr1、Hc-tgfbr2和Hc-tgh-2上游启动子序列的获得

3.3.6 Hc-tgfbr1、Hc-tgfbr2和Hc-tgh-2全长CDS的获得

3.3.7 Hc-tgfbr1、Hc-tgfbr2和Hc-tgh-2在捻转血矛线虫不同发育阶段的转录水平分析

3.3.8 Hc-tgfbr1、Hc-tgfbr2和Hc-tgh-2在秀丽新杆线虫中的空间表达谱

3.3.9 Hc-tgfbr1在秀丽新杆线虫突变株(DR40)中的救援作用评估

3.3.10抑制剂LY2157299评估Hc-TGFBR1对捻转血矛线虫发育影响

3.3.11捻转血矛线虫iL3 RNA干扰(浸泡法)实验方法的建立

3.3.12捻转血矛线虫成虫免疫组织定位方法的建立

3.3.13生物信息学分析

4.结果和分析

4.1.2 Hc-TGFBR1的二级结构和三极结构分析

4.1.3 Hc-TGFBR1进化分析

4.1.4 Hc-tgfbr1不同发育阶段转录水平分析

4.1.5 Hc-tgfbr1基因上游启动子序列的获得

4.1.6 Hc-tgfbr1和Ce-daf-1在秀丽新杆线虫中的空间表达谱

4.1.7 Hc-tgfbr1对秀丽新杆线虫daf-1(DR40)突变株的救援功能评估

4.1.8抑制剂LY2157299对捻转血矛线虫发育的影响

4.1.9 RNA干扰下调Hc-tgfbr1基因表达对捻转血矛线虫发育的影响

4.1.10 Hc-TGFBR1在捻转血矛线虫成虫中的定位

4.2捻转血矛线虫TGF βⅡ型受体Hc-tgfbr2基因结构和功能研究

4.2.1 Hc-tgfbr2全长CDS和gDNA的获得

4.2.2 Hc-TGFBR2二级结构分析

4.2.3 Hc-TGFBI贬进化分析

4.2.4 Hc-tgfbr2不同发育阶段转录水平分析

4.2.5 Hc-tgfbr2基因上游启动子序列的获得

4.2.6 Hc-tgfbr2在秀丽新杆线虫中的空间表达谱

4.2.7 RNA干扰下调Hc-tgfbr2基因表达对捻转血矛线虫发育的影响

4.2.8 Hc-TGFBR2在捻转血矛线虫成虫中的定位

4.3捻转血矛线虫TGF β配体Hc-tgh-2基因结构和功能研究

4.3.2 Hc-TGH-2二级结构分析

4.3.3 Hc-TGH-2进化分析

4.3.4 Hc-tgh-2不同发育阶段转录水平分析

4.3.5 Hc-tgh-2基因上游启动子序列的获得

4.3.6Hc-tgh-2在秀丽新杆线虫中的空间表达谱

4.3.7 RNA干扰下调Hc-tgh-2基因表达对捻转血矛线虫发育的影响

4.3.8 Hc-TGH-2在捻转血矛线虫成虫中的定位

5.讨论

5.1.3 Hc-tgfbr1基因的功能分析

5.2捻转血矛线虫TGF βⅡ型受体Hc-tgfbr2基因结构和功能研究

5.2.1 Hc-tgtbr2基因的结构和序列分析

5.2.2 Hc-tgfbr2基因在不同发育阶段转录水平分析

5.3捻转血矛线虫TGF β配体Hc-tgh-2基因结构和功能研究

5.3.2 Hc-tgh-2基因在不同发育阶段转录水平分析

5.3.3 Hc-tgh-2基因的功能分析

6.结论

参考文献

致谢

附录

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