捻转血矛线虫滞育相关基因daf-22全基因的获得以及其功能研究

摘要

本研究以捻转血矛线虫为研究对象,以秀丽隐杆线虫为模式生物,通过mRNA差异显示技术获得捻转血矛线虫滞育阶段表达差异性基因片段,利用RACE技术和基因步移技术获得滞育相关基因Hc-daf-22基因全序列,并采用RNA干扰技术和拯救技术确定该基因对线虫滞育的影响.研究利用差异显示技术共获得了74个差异片段,比对后以获得的A382(541 bp)为模板,通过5’和3'RACE技术获得了该EST的全序列.证明了捻转血矛线虫daf-22基因对秀丽隐杆线虫daf-22基因突变株进行了部分拯救.将该基因包含功能域的845 bp转化细菌通过饲喂对秀丽隐杆线虫进行RNAi,发现饲喂捻转血矛线虫daf-22基因的虫体,脂肪沉积明显增多,且具有比正常株及阴性对照组大的脂肪颗粒,证明该基因对秀丽隐杆线虫起到了明显的干扰作用.