声明
摘要
缩略词表
1前言
1．1马铃薯的起源及驯化
1．1．1马铃薯起源与传播
1．1．2马铃薯的食用及利用价值
1．2马铃薯块茎形成
1．2．1马铃薯块茎形成的生物学基础
1．2．2温度调控马铃薯块茎形成
1．2．3光介导马铃薯块茎形成
1．2．4高糖促进马铃薯试管薯块茎形成
1．2．5氮影响马铃薯块茎形成
1．3光调控植物生长发育
1．3．1光质与植物生长发育
1．3．2光强与植物生长发育
1．3．3光周期与植物生长发育
1．4光受体介导植物光响应
1．4．1红光／远红光受体介导植物生长发育
1．4．2蓝光受体介导植物生长发育
1．4．3紫外光受体介导植物生长发育
1．5光敏色素介导马铃薯块茎形成
1．6研究的目的及内容
2材料与方法
2．1实验材料
2．1．1植物材料及生长条件
2．1．2菌株及载体
2．1．3引物
2．2实验方法
2．2．1生物信息学分析
2．2．2 DNA抽提
2．2．3 RNA的抽提
2．2．5 PCR和qRT-PCR
2．2．6质粒小量抽提、琼脂糖凝胶DNA回收、质粒酶切及载体构建
2．2．7农杆菌电击
2．2．8烟草瞬时表达及荧光定位
2．2．10免疫共沉淀(Co-IP)
2．2．11农杆菌介导的马铃薯薯片的遗传转化
2．2．12转基因阳性植株的筛选
2．2．13酵母转化
2．2．14酵母双杂交(Y2H)互作验证
2．2．15酵母文库构建
2．2．16酵母杂交文库筛选
2．2．17双分子荧光互补(BiFC)实验
2．2．18 RNA-seq差异表达基因分析
2．2．19数据分析
3结果
3．1马铃薯光敏色素基因结构及序列分析
3．2马铃薯光敏色素在E109、E108中的表达谱分析
3．3干涉马铃薯光敏色素基因对块茎形成的影响
3．3．1以鄂马铃薯3号(E3)为受体的转基因干涉株系的试管薯形成能力
3．3．2以E109为受体的马铃薯StPHYF干涉株系的获得及筛选
3．3．3 StPHYFI-E109转基因干涉株系的块茎形成能力进一步评价
3．3．4 StPHYF和StPHYB转基因超量株系的获得及表型鉴定
3．4马铃薯StPHYF在块茎形成中的作用机制
3．4．1 StPHYF与StPHYB均定位于细胞质及细胞核
3．4．2 StPHYF与StPHYB互作形成异源二聚体
3．4．3 StPHYF及StPHYB涉及调控StCOL1蛋白稳定性
3．4．4 StPHYF和StPHYB对下游基因的表达调控
3．4．5 StPHYF介导的信号长距离运输
3．5 StPHYF及StPHYB互作蛋白筛选与鉴定
3．5．1马铃薯光周期诱导块茎形成的酵母cDNA文库的构建
3．5．2 StPHYF及StPHYB互作蛋白的筛选与分析
3．5．3 StPHYF和StPHYB互作蛋白的KEGG富集及GO分析
3．6 StPHYF及StPHYB转基因干涉株系差异表达基因筛选与鉴定
3．6．1利用RNA-seq对StPHYF转基因干涉株系进行差异表达分析
3．6．2差异表达基因的KEGG Pathway富集及GO分析
3．6．3 qRT-PCR验证部分差异表达基因
4讨论
4．1 StPHYF调控马铃薯在长日照条件下的块茎形成
4．2 StPHYF与StPHYB异源二聚体调控马铃薯块茎形成模式
4．3 StPHYF介导参与调控StCOL1蛋白的稳定性
4．4调控块茎形成的长距离信号的向下传递
4．4自然发生的基因突变导致马铃薯适应性的改变
4．5展望
4．6论文创新点
参考文献
附录
致谢
