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马铃薯青枯菌效应蛋白Rip56和Rip6毒力功能的研究

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第一章前言

1.2.1青枯病的危害

1.2.2青枯菌的侵染方式

1.2.3青枯菌的分类特点

1.3病原菌与植物互作的研究进展

1.3.1植物免疫的主要途径

1.3.2病原菌相关分子模式触发的免疫反应

1.3.3效应蛋白触发的免疫反应

1.4青枯菌研究进展

1.4.1 Ⅲ型分泌系统研究进展

1.4.2胞外多糖研究进展

1.4.3青枯菌效应蛋白功能研究进展

1.4.4 E3泛素连接酶类的细菌效应蛋白的研究进展

1.5钙信号通路研究进展

1.6研究的目的、内容和意义

第二章材料与方法

2.1实验材料

2.1.1植物材料

2.1.2载体和菌株

2.1.3实验试剂

2.2实验方法

2.2.1马铃薯转基因实验

2.2.2 马铃薯转基因植株的功能验证

2.2.3由病毒介导的基因沉默方法

第三章结果与分析

3.1青枯菌效应蛋白Rip56的毒力鉴定

3.1.1利用△Rip56对马铃薯进行接种鉴定

3.1.2效应蛋白Rip56在烟草叶片上瞬时表达

3.2 Rip56转基因株系的获得和检测

3.2.2效应蛋白Rip56转基因株系的获得

3.2.3转基因株系的阳性检测

3.3 Rip56转基因株系植株表型的鉴定

3.3.1 Rip56转基因株系檀株株高的鉴定

3.3.2 Rip56转基因株系的抗性鉴定

3.4 Rip56干扰马铃薯抗性通路的鉴定

3.4.1 Rip56转基因株系中活性氧含量的测定

3.4.2检测Rip56转基因株系的免疫相关标记基因的表达量

3.5 Rip6干扰马铃薯钙信号通路的研究

3.5.1接种验证Rip6转基因株系的转录组数据

3.5.2构建钙信号通路相关基因的超量表达载体

3.5.3 StCML-CAST转基因株系的获得与检测

3.5.4 StCML-CAST转基因株系的抗性鉴定

第四章讨论

4.1进一步探究马铃薯转化效率的影响因素

4.2分析Rip56转基因株系抗性鉴定结果

4.3相关通路基因无法干扰Rip56产生的细胞死亡

4.4分析StCML-CAST转基因株系抗性鉴定结果

参考文献

附录

致谢

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