声明
摘要
缩略语表
1文献综述
1.1豆科植物与微生物互作信号转导途径研究进展
1.1.1大豆及共生固氮的重要性
1.1.2根瘤菌与豆科植物共生形成根瘤过程
1.1.3早期根瘤菌-植物互作信号通路
1.1.4结瘤信号转录因子NIN研究进展
1.2植物先天免疫调节豆科植物结瘤研究进展
1.2.1植物免疫研究进展
1.2.2植物PTI模式识别受体研究进展
1.2.3根瘤菌引起植物免疫反应
1.2.4抑制免疫反应是结瘤能够启动的必要条件
1.3大豆同源基因GmNINa和GmBAK1s研究进展
1.3.1大豆同源基因GmNINa研究进展
1.3.2豆科植物及大豆SERK家族及SERK3/BAK1研究进展
2研究目的及意义
3实验材料与方法
3.1实验材料
3.1.1植物材料
3.1.2菌株及载体构建所用质粒
3.1.3培养基
3.2实验方法
3.2.1大豆的培养条件
3.2.2根瘤菌培养及活化
3.2.3根瘤菌接种与取样
3.2.4基因表达模式分析
3.2.5大豆CRISPR CAS9载体构建
3.2.6发根农杆菌介导的大豆毛状根转化
3.3.7组织化学染色检测启动子活性
3.3.8烟草瞬时表达技术检测目的亚蛋白定位
3.3.9凝胶阻滞实验
4结果与分析
4.1.2 GmBAK1s系统进化分析
4.1.3 GmBAK1s基因结构及编码蛋白结构域分析
4.1.4 GmBAK1a-e表达模式分析
4.1.5 GmBAK1s启动子及序列上NBS结合元件分析
4.2 GmBAK1e表达模式验证和编码蛋白亚细胞定位
4.2.2 GmBAK1e亚细胞定位
4.3 GmBAK1e在大豆结瘤过程的生物学功能分析
4.3.2 GmBAK1e基因过表达结瘤表型分析
4.4 GmNINa调控GmBAK1e机制探讨
4.4.2组织化学染色分析GmNINa对GmBAK1e表达的抑制作用
4.4.3 GmNINa体外直接结合GmBAK1e的启动子NRE结合位点
4.4.4高氮条件下GmBAK1e的表达增强
5讨论
5.3 NIN和NLP共同协调GmBAK1e的表达平衡结瘤与氮需求
6结论与展望
6.1结论
6.2展望
参考文献
致谢