何首乌醇提液对小鼠黑素瘤细胞黑素生成影响及分子机理的研究

摘要

传统中药何首乌具有乌须发的作用。本文运用乙醇提取法对何首乌进行初步提取，以小鼠B16F1黑素瘤细胞为材料。用不同终浓度何首乌醇提取液处理细胞，运用MTT法检测其对细胞增殖的影响；应用体外氧化L-多巴反应方法检测其对细胞中酪氨酸酶活性的影响；通过NaOH裂解法检测其对细胞中黑色素合成量的影响；以RT-PCR的方法检测其对细胞中酪氨酸酶基因、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-l)基因、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)基因及MITF基因表达的影响。结果显示，何首乌醇提取物确实能够刺激B16F1黑素瘤细胞的增殖，激活细胞中酪氨酸酶的活性，并增加黑色素的合成量以及提高上述四种基因的表达量。而且，从结果可以看出，2mg/ml为最佳加药浓度，在一定浓度范围内加药浓度对细胞增殖、酪氨酸酶的活性和基因表达呈剂量依赖性促进作用。促进细胞黑色素合成过程相关基因的表达，这可能是中药何首乌的乌发作用的机制之一。 随着中药现代化理论的提出和发展，用现代药理学解释传统中药的功效已成为中药现代化的必需前提。本文选取用途明确的传统中药材何首乌作为研究对象，用现代的药理学方法和分析手段验证了何首乌促黑素生成功效的合理性，解释了其作用机理，有力地佐证了何首乌乌发的传统功效，为中药传统功效的现代评价提供了有价值的参考。本实验也为后期复方乌发中药的配制、验证中药乌发效果的动物实验及人体实验做了准备工作。