阻断Wnt/β-catenin信号通路对17β-雌二醇作用后子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞活化的影响

摘要

目的：探讨17β-雌二醇(17β-E2)作用后子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞(Endometrial stromal cell，ESC)内是否存在功能性Wnt/β-catenin信号通路的激活，以及阻断该信号通路对ESC活化的影响。
　　 方法：体外分离培养内异症患者在位子宫内膜间质细胞，用10-10 mol/L 17β-E2处理ESC 48 h。免疫细胞化学染色检测17β-E2作用后β-catenin在子宫内膜间质细胞中的表达。通过转染T细胞因子(T-cell facter，TCF)依赖的荧光素酶报告质粒(PGL3-OT)检测ESC细胞内的 Wnt/β-catenin信号，以PGL3-OF 为阴性对照。将 TCF的显性负性突变体(dominant negative TCF，dnTCF)表达质粒转染 ESC阻断 Wnt/β-catenin信号的转导，用 Western blot法检测ESC血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达变化。
　　 结果：免疫细胞化学染色发现17β-E2能促进β-catenin在ESC核内的表达。17β-E2(10-10 mol/L)作用后，转染相同量的质粒，PGL3-OT组细胞荧光活性明显高于 PGL3-OF组(P<0.01)。Western blot检测结果显示17-βE2能明显促进ESC VEGF和MMP-9的表达；转染 dnTCF-3阻断 Wnt/β-catenin信号通路，ESC VEGF和MMP-9的表达较转染空载体(pcDNA3)组均显著下降(P均<0.01)。
　　 结论：17β-E2能促进内异症患者ESC Wnt/β-catenin信号通路的激活，阻断该信号通路可抑制 ESC的活化。