排毒保肾汤含药血清对TGF-β1刺激的人肾小管上皮细胞表达α-SMA及CTGF的影响

摘要

目的：肾间质纤维化是几乎所有慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)走向终末期肾衰竭的共有病理途径。由于其所涉及的细胞因子网络及信号通路非常复杂，因此，尽管肾脏病学者做了大量相关研究并取得了一定的成效，但目前临床上仍然缺乏真正有效的治疗措施，抗肾脏纤维化手段相对单一。基于上述思考，大力发掘中草药潜力，加强疗效显著的临床验方的研究是十分必要的。本实验旨在观察经验方排毒保肾汤含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人肾小管上皮细胞(HKC)表达结缔组织生长因子(CTGF)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响，以进一步探讨该方阻抑肾间质纤维化，保护肾脏的可能作用机制。
　　 方法：制备排毒保肾汤含药血清及正常兔血清。将体外培养的HKC分为5组进行处理(单纯TGF-β1干预组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组、高剂量含药血清组及正常对照组)采用RT-PCR及免疫组化法检测不同剂量的兔含药血清对TGF-β1(10ng/ml)诱导下的HKC表达α-SMA mRNA及CTGF蛋白水平的影响。
　　 结果：采用RT-PCR检测α-SMA mRNA的表达，经TGF-β1诱导48h后，单纯干预组α-SMAmRNA表达较正常对照组显著增加(p<0.01),而不同剂量含药血清均可抑制α-SMAmRNA表达。随着排毒保肾方含药血清剂量升高，α-SMAmRNA表达量呈下降趋势，其中高剂量与低剂量含药血清组比较，差异具有统计学意义(p<0.01)。采用免疫组化法检测CTGF蛋白水平的变化，单纯TGF-β1干预组CTGF蛋白表达水平(5.50±0.57)较正常对照组(0.50±1.00)显著增加(p<0.01)，其中，高、中、低剂量含药血清组CTGF蛋白表达水平依次为2.50±0.577、3.50±1.00、5.00±0.82。
　　 结论：排毒保肾方含药血清发挥阻抑肾间质纤维化的作用可能与抑制肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化有关。

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材料与方法

结 果

讨 论

参考文献

综 述 肾脏纤维化的治疗进展

附 录 硕士期间发表的文章

致 谢