染色质免疫沉淀技术系统优化策略研究

摘要

目的:探讨染色质免疫沉淀(ChIP)实验过程中甲醛交联、超声破碎、免疫沉淀过程影响因素,建立系统优化ChIP技术策略。
　　方法:针对ChIP过程中甲醛固定的时间、超声破碎功率以及时间和免疫沉淀过程时间设计不同实验条件比对,分别利用琼脂糖凝胶电泳、Westernblot技术、DNA-PCR技术检测不同条件下的优化结果。
　　结果:多聚甲醛固定悬浮细胞10min可以在减少非特异交联的情况下获得较好的特异性DNA与蛋白质交联;8-9W功率的超声波冲击冲击5s间隔10s×10次可以是染色质碎片聚积在500bp左右,适合后续免疫沉淀需求;利用免疫磁珠复合物,在4℃条件下孵育2h可以的到满意的免疫沉淀效果。
　　结论:本研究建立的系统ChIP优化条件和优化策略能够对建立一个高效稳定的ChIP实验平台提供了实验技术支持。

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1 绪 言

2 材料与方法

3 实验结果

4 结果分析与讨论

参考文献

6 论文图表

综 述

参考文献

致谢

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