CD39介导异氟醚对小鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用研究

摘要

目的：探讨CD39在异氟醚对心肌缺血再灌注损伤保护中的表达及其意义。
　　方法：选取24只野生型和12只CD39基因敲除雄性BALB/c小鼠,每组12只,共3组.建立经典的小鼠心肌缺血再灌注损伤模型,即心脏冠状动脉左前降支(LAD)结扎缺血1小时及24小时再灌注,手术中均使用氯胺酮联合甲苯噻嗪麻醉并进行心电监护,实验分3组:异氟醚+野生型小鼠(A组),异氟醚+CD39基因敲除小鼠(B组),野生型对照组(C组),每组12只。A组、B组均在缺血阶段通过麻醉机给予1.5％异氟醚+0.3L/m的氧气,C组缺血阶段未做任何处理。三组的小鼠手术前和手术后24小时B超监测心脏功能做前后比较,在灌注24小时后处死小鼠取心脏做氯化三苯四氮唑(TTC)和酞青蓝(PhthaloBlue)染色分析梗死面积。同时用Western-Blot检测再灌注1小时后CD39在心脏中的表达情况。
　　结果：通过对比三组间手术前和心肌缺血再灌注手术24小时后的活体心脏B超检测指标,结果示心脏前后壁的厚度变化差异无统计学意义。对于射血分数缩短FractionalShortening(FS),心输出量CardiacOuput(CO)两指标,A、B组下降程度都比对照组小,A组的下降程度较B组小,CO值中A组为0.37±0.15,B组为1.48±0.48,C组为1.92±0.66,FS值中A组为1.03±0.78,B组为1.48±0.55,C组为2.60±0.63,组间比较差异有统计学意义,P<0.05。运用TTC染色法比较三组在缺血再灌注后24小时心脏梗死面积,结果示A、B两实验组的梗死面积明显低于对照组,A组为0.23±0.06,B组0.42±0.03,C组0.49±0.06,通过方差齐检验可知样本的总体方差齐,组间比较差异有统计学意义,P<0.05.同时运用Western-Blot的方法检测比较心肌缺血再灌注1小时后心脏组织中CD39的表达差异,结果示A组的CD39的表达明显高于对照组,A组的灰度值为2.71±0.22,C组的灰度值为1.76±0.34,p<0.05。
　　结论：在异氟醚对心肌缺血再灌注损伤保护中,CD39在缺血心肌中的表达量升高。在CD39敲除小鼠中异氟醚的保护作用下降但未完全消失。

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