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GeneScan联合BIOMED-2多重PCR法分析127例淋巴增殖性疾病患者Ig/TCR重排

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前言

材料和方法

一、 病例选择

二、 试剂和仪器

三、 骨髓标本采集和分离骨髓单个核细胞冻存

四、 基因组DNA提取

五、 BIOMED-2多重PCR引物进行扩增

六、 用GeneScan方法检测PCR产物

七、 流式细胞仪检测淋巴细胞相关抗原

八、 基因重排结果判读标准

九、 流式结果判读标准

十、 统计学分析

结果

讨论

参考文献

综述: BIOMED-2多重PCR发展概述及其应用

附录1 英文缩写词表

致谢

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摘要

目的:研究淋巴增殖性疾病患者骨髓淋巴细胞Ig/TCR基因重排的特点,比较不同方法在检测NHL骨髓侵犯敏感度方面的差异。
  方法:经组织学确诊的97例B细胞肿瘤和30例T细胞肿瘤,采用BIOMED-2多重PCR法分析其总体和各亚型中Ig/TCR基因重排情况。在71例成熟B-NHL及17例成熟T-NHL中,分别使用流式细胞术检测骨髓淋巴细胞免疫表型和BIOMED-2多重PCR法检测Ig/TCR受体基因重排。
  结果:骨髓标本中,成熟B-NHL和B-ALL中Ig基因克隆性重排阳性率分别为66.3%和100%,成熟T-NHL、T-LBL和T-ALL中,TCR重排单克隆比例分别为85%、20%和100%。成熟B-NHL和成熟T-NHL中,两种检测方法的符合率分别为66.2%和66.7%。在成熟B-NHL及其亚型DLBCL中,两种检测方法的敏感性有明显差异(P<0.05)。
  结论:本研究结果显示,BIOMED-2多重 PCR法对判断淋巴瘤是否有骨髓侵犯具有重要价值,特别是在成熟B-NHL和DLBCL的检测中,该种方法较流式细胞术更为敏感,可为NHL患者的诊断、分层、个体化治疗及预后提供更多信息。

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