雌激素抑制二甲基肼诱导的大鼠结肠癌发生的机制研究

摘要

目的：
　　探究雌激素对DMH诱导的去势雌性大鼠结肠癌模型肿瘤发生的影响及其与肠黏膜上皮增殖相关基因的关系。
　　方法：
　　10周龄SD大鼠33只，于11周龄行双侧卵巢切除术（OVX）构建绝经模型。12周龄时将OVX大鼠随机分为3组：OVX组（n=11）于不同部位每周1次皮下注射芝麻油（连续30周）及生理盐水（连续18周）；DMH组（n=11）于不同部位每周1次皮下注射芝麻油（连续30周）及DMH（溶于生理盐水，连续18周）；E2组（n=11）于不同部位每周1次皮下注射雌激素（溶于芝麻油，连续30周）及DMH（连续18周）。给药期结束后次周剖杀大鼠，记录各组息肉形成情况，收集结肠黏膜及息肉组织，保留血清。利用酶联免疫吸附（ELISA）测定血清癌胚抗原（CEA）的浓度；利用HE染色，光镜下评估结肠黏膜增生情况和息肉病理类型；提取结肠黏膜mRNA，通过实时定量PCR比较3组结肠黏膜雌激素受体（ERα，ERβ）及TGFβ通路的基因转录情况；通过免疫组化评估比较结肠黏膜DNA损伤修复基因（XRCC1和MLH1）和增殖相关基因（P21,c-myc和Ki67）的蛋白表达情况。
　　结果：
　　DMH能够诱导多种病理类型的大鼠结肠肿瘤，如腺瘤、腺癌、粘液腺癌和印戒细胞癌等。雌激素能够缓解DMH诱导的大鼠结肠癌模型中结肠黏膜的增生，并降低结肠息肉的发生率。雌激素能够降低DMH大鼠结肠癌模型血清CEA浓度（p<0.01）；雌激素能够升高DMH大鼠结肠癌模型中结肠黏膜ERβmRNA相对表达量（p<0.01）；并能够提高DMH大鼠结肠癌模型中结肠黏膜TGFβ1 mRNA（p<0.01），Smad2 mRNA（p<0.01），Smad3 mRNA（p<0.01）相对表达量。DMH可以激活结肠黏膜中 MLH1(p<0.05)和 XRCC1(p<0.05)的表达，同时雌激素可以增强MLH1(p<0.01)和 XRCC1(p<0.05)的表达以保护基因组的稳定性；最后雌激素能够促进 DMH大鼠结肠癌模型中结肠黏膜 P21蛋白（p<0.05）表达，抑制DMH大鼠结肠癌模型中结肠黏膜c-myc（p<0.01）以及ki67蛋白（p<0.05）表达来抑制结肠上皮增殖。
　　结论：
　　雌激素能够增强结肠黏膜上皮DNA损伤修复能力和抑制结肠癌大鼠模型结肠黏膜的增殖能力来降低结肠癌大鼠模型结肠息肉的发生。

目录

声明

缩略语

前言

材料与方法

一．实验材料

二．实验方法

三．统计学分析

实验结果

1.30周各组老鼠体重变化

2.肿瘤数目统计

3.肿瘤体积统计

4.结肠黏膜增生情况对比

5.息肉病理学情况

6.血清CEA浓度

7.结肠黏膜雌激素受体及TGFβ相关基因mRNA表达情况

8.DNA损伤修复蛋白表达情况

9.结肠黏膜增生相关蛋白表达

讨论

参考文献

综述:雌激素与肿瘤微环境的研究进展

硕士期间发表的学术论文

致谢