人脑胶质母细胞瘤内皮细胞中血管内皮细胞生长因子受体3的表达及作用

摘要

目的：通过检测人脑胶质母细胞瘤内皮细胞中是否存在血管内皮细胞生长因子受体3(Vascular Endothelial cell growth factor receptor3)的表达，并探讨其在胶质母细胞瘤中对肿瘤血管拟态的影响。
　　方法：采用实时定量PCR技术（real-time PCR）, ELISA技术在脑胶质瘤组织和胶质瘤细胞系 U87，U251中检测血管内皮细胞生长因子C（VEGF-C）的表达。使用real-time PCR技术，免疫组化方法研究人脑胶质母细胞组织和胶质母细胞瘤来源的内皮细胞中VEGFR-3的表达。运用胶质瘤细胞系U87，U251体外细胞学实验，使用VEGFR-3特异性阻滞剂MAZ51作用后；运用血管成形实验检测肿瘤血管内皮细胞血管成形能力，细胞划痕实验检测该细胞迁徙能力及细胞计数方法检测该细胞的增殖能力。
　　结果：人脑胶质瘤组织和肿瘤细胞中检测到有VEGF-C的表达。人脑胶质母细胞瘤组织及其来源的内皮细胞中亦存在VEGFR-3表达。使用MAZ51阻滞的肿瘤血管内皮细胞可见到肿瘤血管内皮细胞的血管成管能力受抑制，增殖、迁徙能力下降。
　　结论：人脑胶质母细胞瘤中 VEGF-C/VEGFR-3参与血管拟态形成， VEGF-C/VEGFR-3可能成为脑胶质瘤抗血管治疗的另一个破点。

目录

声明

前言

1. 实验材料

1.1实验标本及细胞株

1.2原代细胞提取的主要器材

1.3细胞培养主要器材

1.4细胞培养基相关试剂

1.5实验仪器：

2.实验技术与方法

2.1胶质瘤内皮细胞的分离和培养

2.2胶质瘤原代干细胞的分离和培养

2.3细胞系的培养

2.4 RNA的提取

2.5 DAB染色

2.6酶联免疫吸附法（ELISA）

2.7 realtime-PCR

2.8 血管成形功能测定

2.9划痕实验

2.10细胞增殖实验

3.实验结果

3.1 VEGF-C在细胞系和人脑胶质母细胞瘤组织中的表达

3.2 VEGFR-3在人脑胶质母细胞瘤组织中的表达

3.3 VEGFR-3在胶质母细胞瘤血管内皮细胞中的表达

3.4 VEGFR-3在肿瘤血管内皮细胞增殖，迁移和体外血管成形的影响

4.实验讨论：

参考文献

综述:脑胶质瘤中表达的VEGF在抗血管生成治疗中的作用

致谢