细胞色素P450表氧化酶2J2及其代谢产物EETs通过逆转心肌细胞自噬流阻断改善酒精性心肌病的作用及机制研究

摘要

长期大量饮酒可导致心脏扩张、心肌收缩和舒张功能不全，其中酒精的毒性在心脏损伤中发挥着重要作用。细胞色素 P450（Cytochrome P450,CYP450）表氧化酶代谢花生四烯酸(arachidonic acid, AA）生成的环氧-二十碳三烯酸（epoxyeicosatrienoic acid, EETs）在心血管疾病中发挥着重要作用。但EETs对于酒精性心肌病的保护作用尚未有文献报道。本研究旨在探索心肌细胞高表达CYP2J2对酒精性心肌病的保护作用及其机制。
　　本研究采用8周龄的C57BL/6J小鼠，尾静脉注射重组腺相关病毒rAAV9-CYP2J2，2周之后，开始4%（v/v）的Lieber-DeCarli酒精饲料持续喂养8周。使用心脏超声、血流动力学监测、心肌组织学、透射电镜以及蛋白质免疫印迹等方法评价心脏结构和功能的改变。结果表明，长期慢性酒精摄入可以导致心脏扩大，心肌收缩功能不全，而心肌CYP2J2高表达可以改善这些效应。此外，慢性酒精摄入可以引起心肌组织LC3 II/I和SQSTM1表达水平的增高以及 LAMP-2表达水平的降低，说明酒精刺激引起自噬流阻断。而CYP2J2的高表达可以通过逆转自噬流受阻从而发挥心脏保护作用。在细胞实验中，我们发现外源性11,12-EET通过AMPK/mTOR信号通路逆转酒精刺激引起的原代乳鼠心肌细胞自噬流阻断。综上所述，我们的研究表明，细胞色素P450表氧化酶2J2及其代谢产物EETs通过调控AMPK/mTOR信号通路逆转心肌自噬流阻断，从而改善酒精诱导的心功能不全，为酒精性心肌病的治疗提供了可参考的新的治疗策略。

目录

声明

研究背景

第一部分 体内实验高表达CYP2J2对酒精性心肌病小鼠心脏损害的保护作用及机制研究

前言

实验材料

实验方法

实验结果

小结

第二部分 体外实验外源性EETs对酒精诱导的原代乳鼠心肌细胞自噬流阻断的调控机制

前言

实验材料

实验方法

实验结果

小结

讨论

参考文献

综述：酒精性心肌病

致谢