合欢皮水溶性木脂素部位提取纯化工艺及其质量分析

摘要

合欢皮来源于豆科合欢属植物合欢(Albizia julibrissinDurazz.)的干燥茎皮，具有镇静安神、抗肿瘤、消肿活血、抑制生育以及调节人体免疫功能的作用。中医临床用于治疗心神不宁、忧郁失眠等病症。现代药理实验研究表明，合欢皮中的木脂素苷能显著降低哺乳动物的应激反应，可能是起传统镇静催眠作用的主要有效成分之一。本论文对其水溶性木脂素部位的提取纯化工艺条件及质量评价体系进行了系统研究，以期为合欢皮的后期开发研究提供科学的参考。
　　通过提取溶剂单因素实验，采用水溶液和不同浓度乙醇溶液对合欢皮进行提取，比较不同提取溶剂下提取液中木脂素苷的含量和提取物浸膏得率，综合考虑后选取水作为提取溶剂。
　　采用星点设计-效应面法对木脂素苷提取过程中的加水量和提取回流时间两个因素进行优化，应用design-expert软件对木脂素苷含量和得膏率与提取参数之间的关系进行了拟合分析，得到二次多项回归模型。其中，模型方程对应的回归项的P值分别为0.0009和0.0005，多元相关系数分别为R2=0.9239和R2=0.9346，表明模型方程相关度较好，具有统计学意义。通过效应面最高点确定得到合欢皮木脂素苷最佳水提工艺为:12倍的水提取两次，每次114min。
　　采用大孔吸附树脂和SKP聚合树脂纯化技术，结合HPLC-PDA、HPLC-MS分析技术，对合欢皮中的水溶性木脂素类成分的纯化方法进行了系统研究，得到了可靠稳定的纯化工艺参数，并进行了放大研究，验证了合欢皮木脂素苷的提取纯化工艺参数的稳定性。
　　采用HPLC法对10批不同产地合欢皮药材中的木脂素苷的含量进行测定，并通过确定的提取纯化工艺得到了其对应的水溶性木脂素部位，通过HPLC测定得到了木脂素部位中木脂素苷的含量，木脂素苷的转移率为67.8％～72.3％。并利用HS-GC法对合欢皮提取物中大孔树脂的残留溶剂进行测定，结果表明提取物中均未检出残留溶剂。
　　按照CFDA颁布《中药注射剂指纹图谱的技术要求（暂行）》的规定，采用HPLC色谱法建立了合欢皮水溶性木脂素部位的指纹图谱，标定了10批不同产地合欢皮水溶性木脂素部位的13个共有峰，采用UPLC-QTOF技术对合欢皮水溶性木脂素部位指纹图谱中6个木脂素类成分共有峰进行了归属，各色谱峰分离度较好，与对照图谱相似度较高，方法重现性稳定性良好，从而为合欢皮水溶性木脂素部位的质量评价提供了科学的依据。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一章 合欢皮水溶性木脂素部位的提取纯化工艺研究

1 合欢皮水溶性木脂素部位的提取工艺研究

1．1 仪器与试药

1．2 星点设计优化合欢皮木脂素部位的提取工艺

1．3 讨论

2 合欢皮水溶性木脂素部位的大孔树脂纯化工艺研究

2．1 仪器与试药

2．2 树脂型号的选择

2．3 大孔树脂纯化水溶性木脂素部位条件的选择

2．4 讨论

3 SKP聚合树脂纯化合欢皮中水溶性木脂素部位的工艺研究

3．1 仪器与试药

3．2 SKP聚合树脂纯化合欢皮中的木脂素部位

3．3 讨论

4 中试放大研究

4．1 仪器与试药

4．2 中试放大实验

4．3 讨论

第二章 合欢皮及其水溶性木脂素部位的质量分析

1．不同产地合欢皮及其提取物中木脂素苷的含量测定

1．1 仪器与试药

1．2 含量测定

1．3 讨论

2．HS-GC法测定合欢皮提取物中大孔吸附树脂残留物的含量

2．1 仪器与试药

2．2 色谱条件

2．3 溶液的配制

2．4 系统适用性实验

2．5 专属性试验

2．6 方法学考察

2．7 3批样品的测定

2．8 讨论

3 合欢皮水溶性木脂素部位指纹图谱的研究

3．1 仪器与试药

3．2 色谱条件

3．3 供试品溶液的制备

3．4 对照品溶液的制备

3．5 方法学考察

3．6 不同产地合欢皮提取物的指纹图谱研究

3．7 讨论

结语与创新

文献综述 中药合欢皮的研究概况

参考文献

附录

已发表论文

致谢