针刺对脑缺血大鼠神经功能及健侧皮质运动区GAP-43表达水平的影响

摘要

目的：探讨针刺对脑缺血大鼠健侧皮质运动区GAP-43表达水平的影响，及其与大鼠神经功能恢复的关系。
　　方法：选用 SPF级雄性大鼠100只，将100只大鼠随机分成：假手术组20只，造模组80只。对造模组80只大鼠进行线栓法造模，造模成功后，随机分为模型组20只，针刺组60只，针刺组随机分为患侧针刺组20只，健侧针刺组20只，双侧针刺组20只。假手术组和模型组大鼠在同等条件下饲养，未予任何处理。然后对针刺组大鼠进行针刺治疗，患侧针刺组以患侧肩髃、曲池、合谷、三阴交、足三里、环跳为主，健侧针刺组以健侧的肩髃、曲池、合谷、三阴交、足三里、环跳为主，双侧针刺组对两侧肢体都进行针刺治疗，穴位如上，均留针30min，其间每l0min行针1次。每天针刺1次，一个星期针刺治疗6天，休息1天，一个星期为1个疗程。经过针刺治疗后，选取5个时间点（术后24h、治疗第7天、治疗第14天、治疗第21天、治疗第28天）对各组实验大鼠进行神经功能综合评分，评分后选取4个时间点（治疗第7天、治疗第14天、治疗第21天、治疗第28天）每组取5只实验大鼠断头取脑，切取健侧皮质运动区脑组织（前囟前4.5㎜至前囟后0.5㎜）包埋切片，进行GAP-43免疫荧光染色，观察GAP-43表达水平。
　　结果：
　　1.各组实验大鼠的神经功能综合评分
　　模型组和针刺组大鼠Zea-Longa评分、术后24小时评分和假手术组大鼠比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。模型组和针刺组大鼠Zea-Longa评分、术后24小时评分差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。针刺组大鼠治疗后综合评分均优于模型组（P＜0.05）。患侧针刺组、健侧针刺组及双侧针刺组治疗第7天、治疗第14天、治疗第21天、治疗第28天和术后24h比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗第7天、治疗第14天、治疗第21天、治疗第28天，患侧针刺组和健侧针刺组进行组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；双侧针刺组与患侧针刺组、健侧针刺组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗第14天与治疗第7天、治疗第21天与治疗第14天进行组内比较，患侧针刺组、健侧针刺组及双侧针刺组差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗第28天与治疗第21天进行组内比较，患侧针刺组和健侧针刺组差异无统计学意义（P＞0.05），双侧针刺组差异有统计学意义（P＜0.05）。
　　2.各组实验大鼠健侧皮质运动区GAP-43表达水平
　　假手术组中GAP-43红色荧光信号强度微弱（±），可以看到少许信号散在分布于细胞膜上（如图2所示）。模型组中GAP-43红色荧光信号散在于少数的细胞膜上且不连续，红色荧光信号强度呈弱阳性（±）（如图3所示）。针刺组中GAP-43红色荧光信号治疗第7天连续性的表达在整个细胞膜上，红色荧光信号强度增强，双侧针刺组还可以看到一些GAP-43阳性细胞呈现椭圆并且较饱满的细胞体，从胞体上发出一、二根的突起，这是典型的神经元细胞形态（如图4所示）。而患侧针刺组和健侧针刺组未观察到典型的神经元细胞形态（如图8、图12所示）。治疗第14天GAP-43红色荧光信号强度最强，阳性细胞数明显比治疗第7天增多，且细胞形态呈椭圆形且连续性紧密排列（如图5、图9、图13所示）。治疗第21天可见GAP-43红色荧光信号强度减弱，连续性表达于细胞膜上，患侧针刺组和健侧针刺组典型的神经元细胞消失（如图10、图14所示），双侧针刺组可见散在的典型的神经元细胞（如图6所示）。治疗第28天GAP-43红色荧光信号强度继续减弱，信号强度接近假手术组，只能看到少许信号散在分布于细胞膜上，患侧针刺组和健侧针刺组GAP-43阳性细胞消失（如图11、图15所示），双侧针刺组GAP-43阳性细胞呈星点存在（如图7所示）。
　　3.各组实验大鼠健侧皮质运动区GAP-43免疫阳性细胞数的相对比值
　　经ANOVA分析，各组实验大鼠GAP-43免疫阳性细胞数与细胞总数比值差异有统计学意义（F=8.8311，P＜0.05）。说明各组实验大鼠健侧皮质运动区GAP-43表达水平有差异。不同治疗疗程中针刺组GAP-43免疫阳性细胞数明显大于假手术组和模型组，患侧针刺组和健侧针刺组 GAP-43 免疫阳性细胞数相差不大，双侧针刺组GAP-43免疫阳性细胞数最多且明显多于其他组。
　　结论：
　　1.针刺治疗可以促进脑缺血大鼠神经功能的恢复。与模型组比较，健侧针刺组、患侧针刺组及双侧针刺组神经功能都有明显的改善，其中双侧针刺组治疗效果更加显著。所以双侧针刺组在大鼠的神经功能恢复方面有一定的优势。
　　2.针刺治疗可以促进脑缺血大鼠健侧皮质运动区GAP-43的表达。与模型组比较，健侧针刺组、患侧针刺组及双侧针刺组GAP-43的表达水平明显提高，其中双侧针刺组疗效更加显著并可以延长GAP-43的表达时间。所以双侧针刺组在促进脑缺血大鼠健侧皮质运动区GAP-43的表达水平方面有一定的优势。

目录

声明

缩略词表

引言

实验研究

1 实验材料

2实验方法

3 研究结果与分析

4 结论

讨论

1 现代医学对缺血性脑卒中病因及发病机制的认识

2 祖国医学对缺血性脑卒中病因病机的认识

3 缺血性脑卒中临床治疗现状

4 针刺治疗缺血性脑卒中机制的研究

5 巨刺法在针刺治疗中风后偏瘫中的指导意义

6 选穴依据

7 生长相关蛋白-43（GAP-43）与缺血性脑卒中的关系

结语

参考文献

文献综述:针刺治疗缺血性脑卒中后偏瘫的临床运用现状

致谢