Fe3O4/SiO2纳米粒子担载漆酶后的Cu2+修饰及酶学性质研究

摘要

漆酶是一种多铜氧化酶，有较强的催化氧化能力，能够去除多酚，芳香胺，氨基酚，氯酚，这些特性使得漆酶在很多领域有很大的应用价值。与游离漆酶相比，磁性纳米粒子为载体的固定化漆酶具有易回收，快速分离，可重复利用等优点，因此，磁性纳米粒子作为固定化漆酶载体被广泛应用。本实验是以这种Fe3O4/SiO2磁性纳米粒子为载体固载漆酶，得到的固定化漆酶有很好的稳定性。这种载体固载漆酶后能够对偶氮染料进行快速降解，20 min降解率就能够达到80％，而且能够很快从反应体系中分离。
　　研究发现铜离子修饰游离漆酶或是通过螯合作用在载体上，都会对漆酶的活性产生促进作用，同时储存稳定性也得到了提高。所以本文在已有固定化漆酶的基础上用铜离子修饰低固载量固定化漆酶，并研究它的相对活性变化以及修饰后固定化漆酶的酶学性质。
　　实验结果显示：
　　（1）固载量随着漆酶浓度的增加而增加，当漆酶浓度一定时，固载量达到饱和。载体质量为50 mg时，漆酶浓度为0.2 mg/mL时，固载量相对较低为26 mg/g。
　　（2）同100 mM、140 mM铜离子浓度相比较，120 mM铜离子修饰低固载量（26 mg/g）固定化漆酶，相对活性提高得最明显，提高约为54%。
　　（3）铜离子修饰第五天时相对活性最大，120 mM铜离子修饰的固定化漆酶的比表面积也是最大，为28.07 m2/g。
　　（4）修饰后的固定化漆酶的最适pH值为5.0，最适温度为40℃。
　　（5）修饰后的固定化漆酶降解浓度为10 mg/L的普施安染料，有很好的操作稳定性，重复利用十三次后脱色率仍然可以达到92%。
　　（6）用铜离子修饰后的低固载量的固定化漆酶，在常温下保存一个月后，相对活性仍然提高了12%左右，该储存稳定性优于未修饰的固定化漆酶。

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第1章 绪论

1.1 漆酶简介

1.2 漆酶的应用

1.3 漆酶的固定化研究

1.4 铜离子修饰漆酶的研究

1.5 本论文研究内容

第2章 实验部分

2.1 实验仪器和实验主要试剂

2.2 样品的制备

2.3 漆酶固载量的测定

2.4 固定化漆酶修饰

2.5 修饰后固定化漆酶相对活性的测定

2.6 铜离子修饰固定化漆酶的酶学性质研究

2.7 样品的表征方法

第3章 低固载量固定化漆酶的铜离子修饰

3.1 前言

3.2 结果与讨论

3.3 本章小结

第4章 修饰后固定化漆酶的酶学性质研究

4.1 前言

4.2 结果与讨论

4.3 本章小结

结论

参考文献

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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致谢