射干化学成分芒果苷的分离鉴定及药材高效液相指纹图谱的研究

摘要

中药指纹图谱是指运用现代分析技术对中药化学信息以图形(图像)的方式进行表征并加以描述。通过反映中药内在化学成分的种类和数量，提供全面的、综合的信息以控制中药材及中药制剂的质量，是目前国际上认可的、较好的反映中药材及中药制剂质量的质量控制方法。 射干Belamcanda chinensis(L.)DC．属于鸢尾科 Iridaceae射干属Belamcanda植物，我国仅一种。射干是多年生草本植物，原产日本、朝鲜，我国南北各地均有分布，主要生长在林缘或山坡草地等阳光充足的地方。射干是常用中药材之一，其药用部位根茎具有解毒利咽、清肺祛痰、散血消肿之功效。目前临床上对流感、咳嗽、哮喘、急慢性咽喉炎、扁桃体炎、急性喉头水肿、肺炎、泌尿系感染、胃肠炎等病症有较好的疗效，临床应用广泛。 射干中的化学成分有黄酮类、醌类、三萜类、甾类化合物和其它成分。现代药理研究表明其含有的异黄酮类成分具有抗炎、抗病毒、抗氧化及抗肿瘤作用，还有雌性激素样作用，能选择性地治疗和预防心血管疾病。因此具有进一步开发利用的前景。本文中用于射干药材指纹图谱参照峰指认的鸢尾苷(tectoridin)、野鸢尾苷(iridin)、白射干素(dichotomitin)、野鸢尾苷元(irigenin)、次野鸢尾黄素(irisflorcrltin)等属于异黄酮类成分，芒果苷(Mangiferin)属于双苯吡酮类成分。 本文中从射干根茎乙酸乙酯部位中提取到一个极性较大的化合物，为黄色无定型粉末，通过理化鉴别和UV、<'1>H-NMR、<'13>C-NMR的分析，与文献核对，确定为2-C-β-D-吡喃葡萄糖-1,3,6,7,-四羟基双苯吡酮(芒果苷，Mangiferin，C<,19>H<,18>O<,11>)。 本文对射干药材指纹图谱中供试品溶液的制备方法进行了研究，并考察了甲醇-水流动相系统和乙腈-水流动相系统，同时通过加入磷酸、异丙醇和四氢呋喃等方法优化流动相系统，以改善色谱峰的峰形和分离度，并对加入的磷酸、异丙醇和四氢呋喃的浓度进行了研究，确定了流动相系统为A:乙腈-B:0.1％异丙醇0.1％磷酸水溶液。流动相的洗脱梯度为0～15min：乙腈10％～18％；15～40min：乙腈18％～20％；40～100min：乙腈20％～100％；100～110min：乙腈100％～10％。柱温为40℃，进样量为5μl。通过二极管阵列检测器筛选确定检测波长为265nm。指认了指纹图谱中的芒果苷、鸢尾苷、野鸢尾苷、野鸢尾苷元、次野鸢尾黄素和白射干素等六个色谱峰。通过对射干药材高效液相指纹图谱研究的方法进行了系统适应性试验和方法的验证，建立了射干药材的HPLC指纹图谱，建立的方法稳定、可靠、重现性好，指纹图谱中显示的芒果苷、鸢尾苷、野鸢尾苷、野鸢尾苷元等均为单一成份，故也可通过外标法测定它们的含量，建立的HPLC指纹图谱可以作为射干中鸢尾苷等化合物的质量控制方法，也可以用于鉴别，比中国药典2005版对射干药材仅规定次野鸢尾黄素的含量测定更科学、更全面。本研究收集了16个产地的射干药材，选用团风GAP基地生产的射干药材为标准建立了标准指纹图谱，以鸢尾苷峰为参考峰计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，并分别用相关系数法、夹角余弦法和欧式距离法计算了不同产地射干指纹图谱的相似度，从而大致得出了各产地射干药材质量的优劣，为射干种质资源的研究打下了基础，为射干资源的开发利用提供了重要的科学依据。

目录

声明

前言

第一部分芒果苷的分离与鉴定

1.1芒果苷的提取分离

1.2芒果苷的结构鉴定：

第二部分射干指纹图谱方法学的建立

2.1仪器、试剂与药品

2.2对照品溶液的制备

2.3供试品溶液的制备

2.4色谱方法的确定

2.5参照物的选择

2.6 110MIN的图谱

2.7系统适应性试验

2.8方法学的验证

第三部分射干药材HPLC指纹图谱的建立和解析

3.1射干药材样品的来源和预处理

3.2仪器、试剂与药品：同第二章

3.3方法：同第二章

3.4共有模式的建立

3.5不同产地射干药材HPLC指纹图谱

3.6共有指纹峰的标定

3.7指纹图谱的解析

小结与讨论

文献综述

参考文献

致谢

附图表